meilunbio®pH 荧光探针

BCECF AM，即 2′,7′-Bis(2-carboxyethyl)-5(6)-carboxyfluorescein acetoxymethylester，是一种对细胞内 pH 敏感的荧光探针。BCECF AM 是乙酰甲酯化的 BCECF，是一种可以穿透细胞膜的荧光染料。BCECF AM 没有荧光，进入细胞后被细胞内的酯酶水解成 BCECF，从而被滞留在细胞内。BCECF 在适当的 pH 值情况下可以被激发形成绿色荧光。最大激发波长和发射波长因 pH 的不同而有所不同，检测时推荐使用的激发波长为 485 nm，发射波长为 535 nm。BCECF AM 不仅被广泛用于哺乳动物细胞的研究，也有报道用于动物组织、植物细胞、细菌和酵母等的细胞内 pH 水平检测。在有细胞内 pH 变化的细胞毒性、细胞凋亡、细胞粘附、药物抵抗、细胞趋化等过程中BCECF AM 被广泛应用。

BCECF-AM

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应用交流：
细胞内 pH 值在许多细胞生命活动中发挥着重要作用，例如细胞生长，钙离子的调控，胞吞作用，趋化性，细胞粘合和其它细胞活动。BCECF 被广泛地用于细胞内pH 的测定。加入两个羧基的 BCECF 使得它能更好地被固定在细胞内。

BCECF 具有很好的水溶性，是因为它在中性 pH 时带有 4 到 5 个负电荷，但是BCECF 却很难穿过细胞膜进入到细胞内。它的 pKa 值为 6.97，高于其它的羧基荧光素。
BCECF 在激发光谱 439 nm 处有等吸收点，因此它能和 Fura 2 一样可用比率法测定。505 nm 和 439 nm 通常是非常有用的用于比率测量的波长，一般会将 450 nm 和490 nm 的滤光片加在激发光源的前面；而 530 nm 的滤光片则是用来查看它的荧光信号变化的。这里要注意的是，激发光谱与吸收光谱有一些细微的区别。BCECF-AM 是乙酰甲酯化的 BCECF，它能够轻易地进入到细胞内；和其他的乙酰甲酯类一样，BCECF-AM 只需要通过孵育就能进入细胞。