产品介绍:
ATP是生物体内能量转换最基本的载体,其含量的变化直接关系到各器官的能量代谢。ATP作为最重要的能量分子在细胞的各种生理、病理过程中起着重要作用。ATP水平的改变,会影响许多细胞的功能。通常细胞在凋亡、坏死或处于一些毒性状态下,ATP水平会下降,而高葡萄糖刺激等对于一些细胞可以上调细胞内ATP水平。通常ATP水平的下降表明线粒体的功能受损或下降,在细胞凋亡时ATP水平的下降通常和线粒体的膜电位下降同时发生。ATP含量测定试剂盒可以用于检测普通溶液、细胞或组织内的ATP水平。
本试剂盒根据萤火虫荧光素酶(firefly luciferase,也称荧光素酶)催化荧光素产生荧光时需要ATP提供能量研制而成。当萤火虫荧光素酶和荧光素都过量时,在一定的浓度范围内荧光的产生和ATP的浓度成正比。这样就可以高灵敏地检测溶液中的ATP浓度。
产品优势:
- 灵敏度高:在0.1nM至100μM范围内有良好的检测结果。
- 稳定性高:30分钟内样品ATP测定结果下降不超过10%。
- 制备的样品兼容性好:使用本试剂盒中的ATP检测裂解液裂解获得的细胞或组织样品,不仅可以用于ATP检测,还可用于检测蛋白浓度、进行SDS-PAGE或一些常规的较易溶解蛋白的Western检测。
- 使用方便快捷:通常10-20个样品可以在30-60分钟内测定完毕。
- 样品制备简单:样品无需进行高氯酸或三氯乙酸(TCA)抽提,本试剂盒提供了专用裂解液,样品简单裂解后即可用于ATP检测。
储存条件及有效期:
-20℃避光保存,自生产之日起12个月有效。
运输条件:干冰运输。
声明:本产品供科学研究和生产使用,禁止临床使用。
实验数据:
1、细胞ATP含量测定结果
图一:使用我司及对照产品对不同细胞进行裂解后ATP含量测定结果
2、ATP溶液及Vero细胞中ATP含量测定结果
表一:使用我司及对照产品对ATP溶液和Vero细胞中ATP含量的测定结果
产品厂家 | ATP溶液(μM) | Vero细胞(μM) |
我司产品 | 1.53 | 20.27 |
对照产品 | 1.47 | 12.16 |
3、样品稳定性检测
图二:使用我司及对照产品裂解细胞后室温持续检测30min,其ATP含量测定稳定性结果
4、本试剂盒在0.01μM-10μM的浓度范围内有很好的线性关系
图三:本产品对ATP标准品的检测效果(0.01μM-10μM)
5、本试剂盒在0.1nM-100nM的浓度范围内有很好的线性关系
图四:本产品对ATP标准品的检测效果(0.1nM-100nM)
6、裂解后样品用于WB检测实验(以β-actin作为内参)
图五:我司产品及对照产品裂解HL-60细胞后,样品进行WB实验
- 实验结论
- 由图一可以看出,使用我司产品及对照产品裂解不同细胞后检测其ATP含量,我司产品检测数值基本优于对照品。
- 由表一可以看出,我司产品和对照产品检测同样浓度的ATP溶液时,结果相近;但检测同样数量细胞时,我司产品测定结果更高,数据更加准确。
- 由图二可以看出,使用我司产品及对照产品持续检测30min样品中ATP含量,我司产品稳定性优于对照品。
- 由图三、图四可以看出,我司产品在加入10μl-100μl标准品进行检测时,在0.1nM-10μM的ATP浓度范围内具有良好的线性关系。
- 由图五可以看出,使用我司产品及对照产品裂解HL-60细胞后样品进行WB实验,我司产品裂解效果优于对照产品。