产品描述：
支原体在自然界分布广泛，无细胞壁，直径为0.1-0.3μm，且形态易变，极易通过除菌过滤器，通常附着在细胞膜上生长，普通细胞培养用抗生素对其无效。支原体污染发生后，细胞外形可能没有明显的变化，细胞也不会死亡，培养基一般不发生浑浊，严重污染时表现为细胞生长速度变慢，状态变差，细胞形态改变，改变细胞新陈代谢，抑制细胞生长，导致染色体畸变，细胞膜抗原性改变，细胞复苏后存活率降低等。在细胞培养过程中如果在显微镜下发现破碎的细胞很多，培养基pH变化明显，需要频繁更换新鲜培养基才能维持传代培养的时候，即应怀疑支原体污染。
细胞污染常见的支原体种类有：口腔支原体（M.orale）、精氨酸支原体（M.arginini）、猪鼻支原体（M.hyorhinis）、发酵支原体（M. fermentans）、人型支原体（M. hominis）、唾液支原体（M.salivarium）、肺炎支原体（M.pulmonis）和梨支原体（M.pirum）等。支原体检测方法有：培养法、指示细胞（DNA染色）法、NAT核酸扩增（PCR/qPCR）法、ELISA法及扫描电镜法等。
本试剂盒是一种预混PCR试剂，包含高保真酶、引物、阳性对照，用于PCR方法检测细胞培养等生物材料中（如细胞培养物、实验动物分泌物、动物血清）污染的支原体。本产品试剂盒在编码16S和23S rRNA的DNA上设计一对F1/R1引物，扩增编码16S和23S rRNA的DNA间隔区，然后在编码16S和23S rRNA的DNA间隔区的保守区上设计一条F2引物，在编码23S rRNA的DNA上设计一条R2引物进行巢式PCR，可以大大提高检测的特异性和灵敏度。
产品优势：
1、节省时间—仅数小时的PCR扩增和电泳检测即可实现常规培养方法中一周甚至一个月时间才能完成的支原体检测。
2、使用方便—引物预混设计，方便操作；提供了阳性对照，便于确定PCR是否能正常，样品中是否存在抑制PCR反应的物质。
3、检测灵敏性高—使用高灵敏度高保真酶，检测限度在10CFU以下。
4、特异性好—特异性引物设计，采用巢式PCR方法，人源、鼠源、昆虫源细胞，以及细菌、真菌均不会检出。
5、抗干扰能力强—培养体系中的添加物、不同种类的培养基不会影响检测结果。
6、兼容性好—至少可以检出12种细胞污染常见支原体。
保存方法：
-20℃保存，自生产之日起12个月有效。Positive Control Template长期不用时可置于-80℃冷冻保存。
注意事项：
1、所有试剂在使用前请置于冰上彻底解冻、混匀，使用完毕后于-20°C保存。
2、每次实验必须设置阴性对照、阳性对照，实验组建议设置样品模板梯度。
3、操作时必须佩戴口罩，严格按照PCR操作标准，防止引入外源污染，造成假阳性。
4、样品处理、反应体系配制以及PCR的整个过程需要注意避免交叉污染。
5、为了确保细胞实验的可靠性及稳定性，建议定期进行支原体污染检测。
6、如果检测出有支原体污染，需要清除或预防支原体，可以使用支原体预防或清除试剂（美仑货号：MA0339、MA0340）。
7、本试剂盒主要用于检测是否有支原体污染，但也可以通过1st PCR和2nd PCR扩增产物长度大致预测所污染的支原体种属。如果有必要，也可以对PCR产物进行常规测序以确定具体的支原体种属。
8、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。