产品简介：
Bio-Nano萤光素酶报告基因检测系统是一种辉光型定量检测试剂盒，具有高灵敏度和发光信号稳定的特点，符合高通量检测的需求。Bio-Nano萤光素酶是一个经过基因工程改造的小分子酶(19.1kDa)，由进口公司发现，是性能卓越的生物发光报告基因。
本试剂盒使用一种新型底物，可产生高强度、辉光型发光，底物自主开发，国内使用无专利风险。本品信号强度是萤火虫以及海肾萤光素酶的150倍；超强信号稳定性，半衰期可达2小时。Bio-Nano萤光素酶的生物发光反应不依赖ATP，自发光背景低，光信号更亮，同时抑制背景发光以获得最高检测灵敏度。
本品遵守严格的生产及质控程序，更加符合生物药研发企业使用，适于测定药物活性如ADCC或者其他用途。
反应原理如下：
注意事项：
1．检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
2．由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
3．酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测工作液以及细胞培养板平衡至室温。
4．如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以此获得最佳的检测结果。
5．Bio-Nano萤光素酶具有超强信号稳定性，半衰期可达2小时。但是当酶表达量过高时，信号半衰期会缩短，建议优化实验设计方案（如减少质粒转染量），避免萤光素酶表达量过高。
6．Bio-Nano Luciferase Substrate (50x) 配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规格，并混匀后即可使用。
保存条件：
-20℃保存，自生产之日起一年有效。
运输条件：
干冰运输。
产品数据展示
- 细胞内Bio-Nano萤光素酶发光稳定性及线性检测
方法：细胞培养体系下验证光强稳定性及细胞密度-光强标曲。将Bio-Nano萤光素酶载体瞬时转入HEK293T细胞，24h后分别使用PWL208及P品牌同类产品检测细胞水平发光情况。
结果：PWL208的发光亮度强于P进口品牌，PWL208稳定性在1h内与P进口品牌差异不大。PWL208线性关系良好。
图1. 细胞内Bio-Nano萤光素酶发光稳定性及线性检测
- Bio-Nano萤光素酶的发光稳定性及线性检测
方法：在体外将同等浓度的Bio-Nano萤光素酶纯酶分别使用PWL208及P品牌同类产品检测纯酶水平发光情况。
结果：PWL208的发光亮度强于P进口品牌，PWL208稳定性在1h内与P进口品牌差异不大。PWL208线性关系良好。
图2. Bio-Nano萤光素酶发光稳定性及线性检测
- 细胞内对报告基因应答的影响
方法：将含有NF-κB应答元件的启动子调控下的编码Bio-Nano萤光素酶的载体瞬时转染至HEK293T细胞中，并在指定时间用40ng/mL的TNF-α处理，6h后检测发光信号。
结果：经TNF-α处理后，Bio-Nano萤光素酶表达量升高，PWL208效果优于P进口品牌。
图3. TNF-α诱导HEK293T细胞的NF-κB通路对比P进口品牌
- Bio-Nano萤光素酶与Firefly萤光素酶检测灵敏度对比
方法：将相同浓度的报告基因蛋白与相应的检测试剂混合后，检测发光信号。
结果：在同等浓度下，Bio-Nano萤光素酶检测灵敏度远超Firefly萤光素酶，PWL208灵敏度稍高于P进口品牌。
图4. Bio-Nano萤光素酶与Firefly萤光素酶检测灵敏度对比
- 在哺乳动物细胞多种培养基中检测Bio-Nano萤光素酶的相对发光信号
方法：将Bio-Nano萤光素酶稀释在多种培养基及裂解液中，与Bio-Nano Luciferase Reaction Buffer 1：1混合后，检测发光信号。用DMEM培养基进行数据归一化。
结果：Bio-Nano萤光素酶报告基因检测系统与多种细胞培养基相兼容。
图5. Bio-Nano萤光素酶报告基因检测系统在多种培养基中的检测情况
- 在细胞培养多种实验条件下Bio-Nano萤光素酶的相对发光信号检测
方法：将Bio-Nano萤光素酶稀释在含不同种类及浓度血清或溶剂的无酚红DMEM中，与Bio-Nano Luciferase Reaction Buffer 1：1混合后，检测发光信号。用无酚红DMEM进行数据归一化。
结果：Bio-Nano萤光素酶报告基因检测系统与多种细胞培养条件相兼容。
图6. Bio-Nano萤光素酶报告基因检测系统在细胞培养多种实验条件下的检测情况