产品简介
一氧化氮检测试剂盒（DAF-FM DA）是以DAF-AM DA为荧光探针，快速高灵敏地检测培养的细胞内一氧化氮含量变化的试剂盒。
DAF-FM DA即4-Amino-5-Methylamino-2,7-Difluorofluorescein Diacetate，也称DAF-FM Diacetate，是用于一氧化氮（nitric oxide，NO）定量检测的探针，与以往的一氧化氮荧光检测探针DAF-2 DA相比较，主要有以下优势：一是DAF-FM DA和NO反应形成的荧光产物在pH 5.5以上不受pH影响；二是反应产物荧光更加稳定，不容易淬灭，更加便于检测；三是DAF-FM DA的最低检测浓度可达到3nM，与DAF-2 DA相比最低检测浓度提高近2倍。
DAF-FM DA检测NO原理为：DAF-FM DA可以穿过活细胞膜，进入细胞后可以被胞浆内的酯酶催化形成不能穿过细胞膜的DAF-FM，DAF-FM本身仅有很弱的荧光，但在与NO反应后会生成荧光素-苯骈三氮唑（benzotriazole），可以产生强烈绿色荧光。
本试剂盒提供的DAF-FM DA为5mM储存液。DAF-FM DA的终浓度通常为1-10μM，最优先的推荐终浓度为5μM。外源性添加的NOup（200×），推荐终浓度为0.5-2×，最优先的推荐终浓度为1×。本试剂盒可使用荧光显微镜、激光共聚焦显微镜、流式细胞仪、荧光酶标仪等荧光检测设备进行检测。同时，本试剂盒提供了检测缓冲液及阳性对照NOup，使用更便捷。
本试剂盒适合用于检测细胞内的一氧化氮水平，可以进行实时检测。如果收集细胞后再装载探针，通常小包装至少可以检测40个样品，中包装至少可以检测200个样品。6孔板每孔检测体系的体积为1mL时，小包装和中包装分别约可以检测20和100次。96孔板每孔检测体系为100μL时，分别可以检测200次和1000次。
产品优势：
方便快捷：试剂盒包含检测所需的缓冲液和阳性对照，简化了实验前期准备工作。
标记效果好：DAF-FM DA标记NO后荧光明亮；可以检测NO在细胞内的分布水平。
兼容性好：进入细胞后荧光不受内环境影响，可检测各种不同来源细胞。
保存条件
-20℃避光密闭保存，自生产之日起12个月有效。
运输条件
湿冰运输（按季节）。
注意事项
1、BSA和酚红对该荧光探针的检测有干扰，需避免。
2、第一次使用前请将本品分装并于-20℃冻存，避免反复冻存；荧光探针工作液需立刻使用，不能长时间保存。
3、DAF-FM DA在2-8℃、冰浴等较低温度情况下会凝固而粘在离心管管底、管壁或管盖内，可以20-25℃温浴片刻至全部融解后使用。
4、仅在阳性对照孔中加入NOup作为阳性对照，其余孔不必加入NOup。
5、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
实验数据
图1. DAF-FM DA检测正常细胞及NOup处理后的阳性对照细胞