重组牛肠激酶(rb-EK)

产品简介：

本产品是一种高纯度的重组牛肠激酶。

分子量：25,850DA (理论MW )

特点：

• 高纯度: 该酶经HPLC纯化，纯度高。
  
• 高特异性
  1）特定的蛋白酶，切割前面含有四个天冬氨酸的赖氨酸羧基端位点：天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-天冬氨酸-赖氨酸(DDDDK)
  2）不含其他蛋白酶,无非特异性切割
  上图一：SDS-PAGE检测结果，纯化的肠激酶一个单一的主带
  上图二：0.1U的EK作用于50µg底物0min,10 min,20 min,30 min,40 min,50 min,60 min后的SDS-PAGE分析

酶切条件：

按照酶活性定义，重组EK酶切条件举例，25mM Tris-HCl 8.0体系中

项目	值
活性（1U定义）：在25℃，12h~16h之内，将0.50mg融合蛋白在25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中切割95%所需的酶量。
融合蛋白浓度	0.1-1mg/ml（蛋白总量0.50-1.0mg）
重组EK用量	1.0-2.0U
酶切温度	25℃
酶切时间	过夜酶切，或完全酶切需12h-16h

常见影响肠激酶活性的因素：

在>200mM咪唑，或>200mM NaCl，或>5%甘油，酶切效果受影响。可参照以下推荐方法进行酶切：

1. 为获得理想酶切结果，请将样品透析到25mM Tris-HCl pH8.0缓冲液中，再进行酶切。
2. 若不便透析，可将样品稀释，咪唑含量在100mM以下，NaCl浓度在50mM以下，甘油浓度小于5%以下进行酶切，酶的用量与蛋白的比例不变（即1U酶切0.5mg蛋白）。
3. 如果样品溶液中含有上述成分中的一种或多种，且不便去除，此时适当增加酶量或延长酶切时间，也可达到较好酶切效果。

储存条件：

-20℃，避光防潮密闭干燥。

运输条件：

2~8℃运输