Etomoxir

Etomoxir 是一种有效的肉毒碱棕榈酰基转移酶 (carnitine palmitoyltransferase-I，CPT-1) 抑制剂。

靶点

CPT-1

体外研究

Etomoxir不可逆地结合到CPT-1抑制其活性的催化位点，但也上调脂肪酸氧化酶。 Etomoxir是作为线粒体肉碱棕榈酰基转移酶-1（CPT-1）的抑制剂开发的，位于线粒体外膜上。 Etomoxir在肝脏中可以作为过氧化物酶体增殖物，增加DNA合成和肝脏生长。因此，除了作为CPT1抑制剂之外，还可以将etomoxir视为PPARα激动剂。 Etomoxir是环氧乙烷羧酸肉碱棕榈酰转移酶I抑制剂的成员，并且已被认为是治疗心力衰竭的治疗剂。急性Etomoxir治疗不可逆地抑制肉碱棕榈酰转移酶I的活性。结果，脂肪酸进入线粒体和β-氧化降低，而胞质脂肪酸积累并且葡萄糖氧化升高。与Etomoxir长时间孵育（24 h）会对几种代谢酶的表达产生不同的影响

体内研究

Etomoxir是游离脂肪酸（FFA）氧化相关关键酶CPT1的抑制剂。 P53与Bax直接相互作用，Bax受Etomoxir抑制，进一步证实了P53和Bax的直接相互作用以及db / db小鼠中介导的FAO介导的线粒体ROS生成。 大鼠每日注射Etomoxir（一种特异性CPT-1抑制剂），以20mg / kg体重持续8天。 Etomoxir处理的大鼠显示心脏CPT-1活性降低44％。 用20mg / kg Etomoxir治疗Lewis大鼠8天不会改变血糖，这与可比的依托咪酯喂养研究相符。 同样，Etomoxir喂养不影响一般生长特征，如体重增加，也不会影响后肢肌肉质量。 然而，在Etomoxir治疗的大鼠中，心脏质量和肝脏肿块均显着增加了11％。

(+)-Etomoxir sodium salt；Etomoxir sodium;R)-(+)-乙莫克舍钠盐

MB3406

Perhexiline maleate

MB1126

盐酸伊立替康,(CPT-11)

MB5023

2-氯-5-硝基苯甲酰苯胺;GW 9662

MB3813

GSK3787

MB3709

GW0742

MB7303

GW501516

MB4844

L-165041

MB3812

T0070907

MB1227

Streptozocin；糖尿病建模剂

MB0041

阿脲；四氧嘧啶(用于糖尿病造模)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.0598 mL

15.2989 mL

30.5979 mL

5 mM

0.6120 mL

3.0598 mL

6.1196 mL

10 mM

0.3060 mL

1.5299 mL

3.0598 mL

• 将Etomoxir溶于DMSO并储存，然后在使用前用适当的培养基稀释。

将大鼠心脏H9c2成肌细胞在含有10％胎牛血清的DMEM中温育直至接近汇合。在一些实验中，在存在或不存在1-80μMEtomoxir的情况下，用DMEM（无血清）将细胞预培养2小时，然后用0.1mM [1-14C]油酸（10μCi/培养皿，以1：1的摩尔比结合BSA）。在其他实验中，将细胞预培养2小时加或减40μMEtomoxir，然后用0.1μM或0.1mM [1,3-3H]甘油（10μCi/培养皿），0.1mM [1-14C]培养2小时，油酸（2μCi/皿，以1：1摩尔比结合BSA），0.1mM [1-14C]棕榈酸（2μCi/皿，以1：1摩尔比结合BSA），28μM[ 3H]乙醇胺（2μCi/培养皿），28μM[甲基-3H]胆碱（2μCi/培养皿），0.4mM [3 H]丝氨酸（20μCi培养皿）或40μM肌醇[10μCi /碟）。除去培养基，细胞用冰冷的盐水洗涤两次，然后用2mL甲醇 – 水（1:1，v / v）从培养皿中收获用于脂质提取。取等分试样的匀浆用于测定细胞中放射性的总摄取量。然后分离磷脂并确定其中的放射性

动物实验

• 将Etomoxir溶于0.9％（w / v）NaCl中。
• 小鼠
• 使用80只雄性C57BLKS / J lar-Leprdb / db小鼠和20只野生型同窝小鼠（8周）。 db / db小鼠随机分为四组：db / db组，Etomoxir组，MitoQ组和PFT-α组。在Etomoxir组中，小鼠每周两次腹膜内注射1 mg / kg Etomoxir。在MitoQ组中，将50μMMitoQ给予水中的小鼠。装有MitoQ的水瓶盖上铝箔，所有瓶子每3天重新灌装一次。在PFT-α组中，小鼠每周两次腹膜内注射1mg / kg PFT-α。 WT小鼠改为用赋形剂施用。实验期为8周。最后，收集外周血样品和骨髓细胞用于测定。
• 大鼠
• 本研究中使用体重150-200克的雄性Lewis大鼠。将动物保持在12小时：12小时光照/黑暗周期并随意喂食Purina Chow饮食和水。将大鼠分成两组：（1）对照和（2）Etomoxir。将Etomoxir（20mg / kg体重）溶于0.9％（w / v）NaCl中并腹膜内施用8天。对照大鼠接受盐水。实验前24小时给予最后一次注射。腹膜内注射戊巴比妥和肝素（3：1）混合物麻醉动物。随后，取出心脏进行LCFA摄取研究并分析转运蛋白含量。