Enalaprilat Dihydrate

Enalaprilat Dihydrate是一种新型血管紧张肽转化酶(ACE)抑制剂，IC50为1.2 nM。

特性

Enalapril是第一个含二甲酸乙基酯的ACE抑制剂。研发Enalapril是为了和captopril作比较。

靶点

体外研究

Enalaprilat是Enalapril的二价酸代谢物，口服没有生物活性，必须静脉注射处理。表达B1R-YFP的HEK 293细胞对Enalaprilat激活的磷脂酶A2没有反应，而对Lys-des-Arg9-BK反应很强烈。放射性标记的Enalaprilat不会结合到表达重组人类B1R 的细胞中, 但是高特异性结合到人类脐静脉内皮细胞重组ACE (0.25-10 nM) 或正常表达的ACE上(KD=0.23 nM)。Enalaprilat作用于表达B1Rs的HEK 293a 细胞，不会刺激钙信号通路。体外研究显示Enalaprilat有效抑制脑ACE，而enalapril抑制效果则很弱。

体内研究

Enalaprila作用于自发性高血压鼠，对组织(血清,肾,脑,和主动脉)产生明显的ACE抑制效果。体内，血清中活性代谢产物Enalaprilat的吸收导致enalapril 抑制主动脉ACE 活性。Enalaprilat激活 B1受体和刺激肾脏中产生NO，促进血管舒张。

Captopril

MB1527-S

Captopril（标准品）

MB25028

卡托普利-d3

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.8703 mL

14.3513 mL

28.7026 mL

5 mM

0.5741 mL

2.8703 mL

5.7405 mL

10 mM

0.2870 mL

1.4351 mL

2.8703 mL

50 mM

0.0574 mL

0.2870 mL

0.5741 mL

激酶实验:
Enalaprilat溶解在0.05 M硼酸盐-磷酸盐buffer中, pH 为8.0,浓度为 5×10-3M；溶解在NaCl，浓度为0.17 M。用这种buffer再配制稀释液。100 μL每种3.7×10-4M底物溶液 Cbz-Phe-His-[14C-Leu]-OH, 每管5.5×104c.p.m，和转换酶稀释液，加到100 μL of Enalaprilat溶液中，温育后，从上清液中获得约1.2×104c.p.m.。底物最终浓度为1.2×10-4M。Km值为1-2×10-4M。反应在30oC下温育1小时, 然后加入1 mL 溶于0.05 M硼酸盐buffer的苯甲酰化DEAE (BD)纤维素40%悬浮液, pH为11，或者溶于0.05 M 硼酸盐buffer 的20% BD Sephadex, pH为7.7，终止反应。没处理的底物结合到BD 上，通过cotton-plugged Sarpette(尺寸102/2)过滤，从上清液分离。全部的上清液和冲洗BD残渣的0.5mL buffer 收集在闪烁瓶中。 在10 mL PCS计数10分钟。测定IC50值。

细胞实验：

• Cell lines:Rat cardiac fibroblasts cell lines
• Concentrations:Dissolved in DMSO, final concentrations 1 nM – 10 μM
• Incubation Time:24 hours
• Method:After 24 hours incubation in serum-free medium (DMEM), cells are stimulated with IGF-I (1-100 nM) and coincubated with Enalaprilat (1 nM-10 μM) for 24 hours. Cellular proliferation is assessed by 5-bromo-2′-deoxyuridine (BrdU) incorporation during the last 4 hours of the 24 hours incubation period using a colorimetric immunoassay. The extinctions are measured at 450 nm in an ELISA plate reader. All values consist of an n=9.

动物实验：

• Animal Models:20-24周大的雄性自发性高血压鼠
• Formulation:溶于盐水中
• Dosages:0.01, 0.03和0.1 mg/kg.
• Administration:静脉注射处理