Torin 2

Torin 2 是一种有效的选择性mTOR抑制剂，在p53−/− MEFs细胞系中IC50为0.25 nM；作用于mTOR比作用于PI3K选择性高800倍，并且改善了药代动力学性能。抑制ATM/ATR/DNA-PK，在PC3细胞系中EC50分别为28 nM/35 nM/118 nM。

靶点

体外研究

Torin 2与PI3Kγ具有相同的结合模式，V882作为铰链结合点，在内部疏水袋Y867，D841 和D964再提供三个作用于氨基比林侧链的氢键，类似于mTOR的Y2225，D2195 和D2357。Torin 2抑制mTORC1，因此通过促进其核转运激活TFEB，EC50为1.666 mM。Torin 2(< 50 nM)引起MZ-CRC-1和TT细胞的活性显著减少。Torin 2 (100 nM)使MZ-CRC-1和TT细胞的迁移显著减少。

体内研究

在小鼠肝微粒体稳定性试验中，Torin 2表现出>95%的药效学响应，和11.7分钟的半衰期。Torin 2静脉内或口服给药后，在雄性Swiss albino小鼠体内表现出最好的生物利用度(51%)，短 的半衰期(0.72小时)和低清除率(19.6 mL/min/kg)。在Th-MYCN 小鼠体内，Torin 2(20mg/kg)消除MYCN肿瘤，减少MYCN蛋白质水平，并诱导细胞凋亡。

Torin 1

MB3869

GSK2126458 (GSK458)

MB4285

INK 128 (MLN0128)

MB3438

KU-0063794

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3127 mL

11.5634 mL

23.1267 mL

5 mM

0.4625 mL

2.3127 mL

4.6253 mL

10 mM

0.2313 mL

1.1563 mL

2.3127 mL

50 mM

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mTOR 和 PI3K 细胞试验:
对mTOR的细胞IC50值使用p53−/− MEFs测定。细胞用载体或逐渐增减浓度的Torin 2处理1小时，然后裂解。S6K1 Thr-389的磷酸化使用磷酸-特异性抗体进行免疫印迹监测。同时，对PI3Ka的细胞IC50值，在p53−/−/mLST8−/−MEFs或表达S473D突变体Akt1的人PC3细胞中，基于Akt Thr-308的磷酸化进行测定。

细胞实验：

• Cell lines:MZ-CRC-1 和 TT 细胞
• Concentrations:50 nM
• Incubation Time:3 天或 5 天
• Method:对于活性测定，MZ-CRC-1和TT细胞以一式四份接种在96孔板(1.0×104细胞/孔)，培养基分别包含2.5%和4% FBS。24小时后，细胞用Torin 2处理。在指定时间点，细胞与10 μL CellTiter96 AQueous One溶液在100 μL培养基中培育3小时，吸光度在490 nm下测量。

动物实验：

• Animal Models:雄性 Swiss albino 小鼠
• Formulation:首先以25 mg/mL溶解在100% N-甲基-2-吡咯烷酮中，然后以1:4用无菌50% PEG400稀释，再用于注射
• Dosages:25 mg/kg
• Administration:静脉内或口服给药