LAQ824 (Dacinostat)

达诺司他是新型HDAC抑制剂，IC50为32 nM，且激活p21启动子。

靶点

HDAC

IC50

32 nM

体外研究

在体外, LAQ824抑制H1299细胞裂解液中的人HDAC活性，IC50为32 nM。此外, LAQ824通过激活p21启动子，也激活编码p21细胞周期抑制剂的基因表达，最大启动子活性(AC50)为50%时，浓度为0.30 μM。处理72小时后, LAQ824抑制H1299（一种非小细胞肺癌细胞）和HCT116（一种结肠癌细胞）细胞生长，IC50分别为0.15 μM和0.01 μM, LAQ824的抗增殖效果选择性作用于肿瘤细胞系。而且, LAQ824作用于A549细胞，促进p21蛋白增多，这种作用存在剂量依赖性，且提高Rb肿瘤抑制基因的次磷酸化状态。最新研究显示LAQ824在IL-10基因启动子水平诱导染色体变化，导致转录抑制剂HDAC11和PU.1需求增加，且抑制BALB/c巨噬细胞中IL-10产量。

体内研究

LAQ824按100 mg/kg剂量作用于携带HCT116和人结肠癌移植瘤的裸鼠，抑制肿瘤生长，且无细胞毒性，这种作用存在剂量依赖性。

特征

LAQ824是非常有效的组蛋白脱乙酰基酶抑制剂。

JNJ-26481585

MB3741

MC1568

MB3550

LMK235

MB6006

Pracinostat (SB939)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6353 mL

13.1767 mL

26.3533 mL

5 mM

0.5271 mL

2.6353 mL

5.2707 mL

10 mM

0.2635 mL

1.3177 mL

2.6353 mL

50 mM

0.0527 mL

0.2635 mL

0.5271 mL

体外组蛋白脱乙酰基酶实验 :
通过离子交换层析，使用Q 琼脂糖快速流动柱，使HDAC酶部分从H1299细胞溶解物中纯化。通过与cdk2多克隆抗体 或cdk1/cdc2单克隆抗体进行免疫沉淀反应，从500 mg 全部细胞溶解物中收集酶复合物。免疫沉淀物再悬浮在激酶buffer (50 mM Hepes, pH 8, 10 mM MgCl2, 2.5 mM EDTA, 1 mM 二硫苏糖醇, 20 mM ATP, 10 mM β-甘油磷酸, 0.1 mM NaVO4, 1 mM NaF, 50 mM ATP, 10 μCi [γ-32P]ATP),及1 μg pRb 重组蛋白底物(cdk2)或含 20 μg 底物(cdc2)到的10 mL H1组蛋白混合物。电泳分析磷酸化的Rb和 H1 组蛋白，然后使用PhosphorImager量化。

细胞实验

• Cell lines:H1299, HCT116, DU145, PC3 和 MDA435
• Concentrations:0 到10 μM
• Incubation Time:48小时
• Method:通过3-MTS实验测定细胞增殖。然后进行CellTiter 96 AQueous 非放射性细胞增殖实验。取每组实验的平均值。

动物实验

• Animal Models:在右腋区皮下注射HCT116细胞的远系繁殖系无胸腺(nu/nu)雌鼠
• Formulation:溶于DMSO
• Dosages:≤100 mg/kg
• Administration:静脉注射