XL147 analogue

XL147 (SAR245408)是选择性的，可逆的I型PI3K抑制剂，抑制PI3Kα/δ/γ，IC50为39 nM/36 nM/23 nM,对PI3Kβ作用效果稍弱。

靶点

PI3Kγ
(Cell-free assay)

PI3Kδ
(Cell-free assay)

PI3Kα
(Cell-free assay)

PI3Kβ
(Cell-free assay)

IC50

23 nM

36 nM

39 nM

383 nM

体外研究

XL147是选择性的可逆PI3K抑制剂，作用于p110α时IC50为40 nM。XL147抑制PI3K亚型，是ATP竞争性抑制剂。在HER2过量表达的人类乳腺癌细胞系中，用XL147处理，抑制AKT和S6的磷酸化，且诱导HER3和其他RTK的表达和磷酸化作用。在HER2+细胞中, HER2酪氨酸激酶催化HER3磷酸化作用，导致pAKT的部分恢复，因此限制XL147的抗癌活性。此外，HER3的降低或者用抗HER2药剂trastuzumab或lapatinib处理使HER2+乳腺癌细胞对XL147敏感。用XL147处理，抑制所有实验细胞的单层细胞生长，包括BT474, HCC1937等等，这种抑制存在剂量依赖性。XL147的主要功效是抑制细胞增殖。XL147浓度为20 μM时诱导细胞死亡。XL147抑制PI3K，存在剂量依赖性。抑制细胞凋亡的同时, XL147诱导cyclin D1和pRB降低，且诱导CDK抑制剂p27KIPI的水平升高，但是作用于PARP和cleaved PARP时的改变不明显。用XL147处理，导致pAKTS473/T308和pS6S240/244降低，也存在剂量依赖性。XL147也正向调节HER3和/或pHER3Y1289的水平。HER2过量表达的细胞,多受体酪氨酸激酶（包括HER3）的磷酸化和表达得到正向调节，随后PI3K受到抑制。抑制PI3K，而诱导产生HER3, InsR, IGF1R,和FGFR2 mRNAs，FoxO1的降低和FoxO3a转录因子阻断这种诱导。在HER2+细胞中, HER3 siRNA的降低或者和HER2抑制剂Trastuzumab或Lapatinib联用增强XL147诱导细胞死亡，且增强抑制pAKT和pS6的效果。Trastuzumab和lapatinib中任一个和XL147协同作用增强抑制pAKT和BT474移植瘤的生长。

体内研究

携带BT474移植瘤的无胸腺鼠随机用XL147, lapatinib, trastuzumab,或XL147及每种HER2拮抗剂处理。每种单一疗法明显抑制肿瘤生长，其中有八分之一鼠用trastuzumab单一治疗的，其肿瘤完全衰退。联合给药比单独用药效果高很多。Trastuzumab和XL147联用,而不是lapatinib和XL147联用处理,诱导八分之三的肿瘤反应。但是任何一种处理都没有明显的药物相关毒性。XL147和trastuzumab联用抑制pHER3比其他处理效果高很多。XL147和lapatinib联用，或者XL147和trastuzumab联用处理肿瘤，导致核pAKT明显低于单独给药的组别。在三组单独给药中, XL147是唯一显示抑制核pAKT水平的。细胞质pAKT水平没有明显改变。

PIK-90

MB3891

GSK1059615

MB3571

BAY 80-6946

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2296 mL

11.1478 mL

22.2955 mL

5 mM

0.4459 mL

2.2296 mL

4.4591 mL

10 mM

–

–

–

50 mM

–

–

–

• Cell lines:BT474和HCC1937细胞
• Concentrations:0-20 μM
• Incubation Time:72小时
• Method:

BT474, HCC1937等细胞接种在含2.5% FBS的培养基上。3天后，分离的细胞和粘附的细胞合并，混合，通过使用APO-BrdU试剂盒，用碘化丙啶做标签。使用Becton Dickinson FACSCalibur系统分析标记的细胞。

动物实验：

• Animal Models:携带BT474细胞的雌性无胸腺鼠
• Formulation:溶于10 mM盐酸，无菌水注射
• Dosages:100 mg/kg
• Administration:口服饲喂