MI-2 (Menin-MLL Inhibitor)

375.55

化学式

C18H25N5S2

CAS号

1271738-62-5

稳定性

3 years -20°C powder

75 mg/mL warmed (199.7 mM)

Ethanol

75 mg/mL (199.7 mM)

Water

Insoluble

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.6628 mL

13.3138 mL

26.6276 mL

5 mM

0.5326 mL

2.6628 mL

5.3255 mL

10 mM

0.2663 mL

1.3314 mL

2.6628 mL

50 mM

0.0533 mL

0.2663 mL

0.5326 mL

MI-2 (Menin-MLL Inhibitor)是一种有效的menin-MLL相互作用抑制剂，IC50为446 nM。

靶点

体外研究

在HEK293细胞中，MI-2访问蛋白质靶点，并有效抑制menin-MLL-AF9相互作用。MI-2通过下调MLL融合蛋白致瘤活性必需的靶点基因的表达，有效阻断MLL融合蛋白介导的白血病转化。对于含有不同MLL易位的人MLL白血病细胞系，MI-2也能有效阻断细胞增殖，并诱导细胞凋亡

高通量筛选:
15 nM FITC-MBM1和150 nM menin在FP缓冲液中混合，并在黑暗中室温下培养1小时。对于点筛选，0.2 μL的各种化合物(20 μM 终浓度，1% DMSO)加入到20 μL等分蛋白质-多肽混合物中，并在384孔板上于黑暗中室温下培养1小时。为确认筛选，化合物在DMSO中连续稀释制备稀释平板，用于滴定menin-FITC-MBM1络合物。荧光偏振的改变在495 nm 波长下激发后，使用PHERAstar 酶标仪(BMG)在525 nm波长下监测，并用于Origin 7.0程序测定IC50值。

细胞实验：

• Cell lines:MLL-AF9 和 E2A-HLF 转导的小鼠 BMC
• Concentrations:~20 μM
• Incubation Time:12天
• Method:MLL-AF9 和 E2A-HLF转导的小鼠BMC以5×103 细胞/毫升的浓度接种于12孔板， 在包含20% IMDM 培养液，1% 青霉素/链霉素， IL-3 和 0.25% DMSO或化合物的 1 mL 甲基纤维素培养基中培养。6天后，菌落用100 μL终浓度为1 mg/mL的碘硝基氯化四氮唑蓝着色，在37℃下培养30分钟，并计数。对于第二轮，菌落不着色，在第6天计数，细胞通过1×PBS缓冲液洗出，重悬浮于含有15% FBS，1%青霉素/链霉素和IL-3的IMDM培养基。5×103个细胞接种于12孔板，在含有20% IMDM 培养液，1% 青霉素/链霉素， IL-3 和 0.25% DMSO或化合物的1ml甲基纤维素培养基中培养。6天后，将菌落着色并计数。