AS-604850

AS-604850是选择性的，ATP竞争性PI3Kγ抑制剂，IC50为250 nM,作用于PI3Kγ比作用于PI3Kδ/β选择性高80倍以上,作用于PI3Kγ比作用于PI3Kα选择性高18倍。

靶点

PI3Kγ

PI3Kα

IC50

0.25 μM

4.5 μM

体外研究

AS-604850 是一种ATP竞争性PI3Kγ抑制剂，Ki值为0.18 μM。AS-604850是PI3Kγ亚型的选择性抑制剂，选择性是PI3Kδ和β的30倍，是PI3Kα的18倍 (PI3Kα: IC50 = 4.5 μM，PI3Kδ 和 β: IC50 > 20μM) 。AS-604850能够抑制RAW264小鼠巨噬细胞中C5a-介导的PKB磷酸化，IC50为10 μM。AS-604850浓度依赖性阻断Pik3cg+/+单核细胞中MCP-1介导的趋药性，IC50为21 mM，但是不影响Pik3cg-/-细胞中的趋药性，表明AS-604850通过PI3Kγ发挥作用。AS-604850减少大鼠肝细胞中甘氨鹅脱氧胆酸钠(GCDC)诱导的Akt磷酸化和细胞凋亡。在HepG2 Ntcp和Huh7-Ntcp 细胞中，AS-604850减少胆汁盐诱导的细胞凋亡。AS604850浓度依赖性抑制EoL-1细胞和血液噬酸细胞对血小板激活因子(PAF)的趋药响应。

体内研究

AS-604850降低RANTES诱导的腹膜中性粒细胞聚集，ED50为42.4 mg/kg。在巯基乙酸盐诱导的腹膜炎模型中，10 mg/kg AS-604850口服给药导致中性粒细胞减少31%。

AS-605240

MB3878

AS-252424

MB3572

CAY10505

MB5316

CZC24832

MB8065

TG100-115

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.5061 mL

17.5303 mL

35.0607 mL

5 mM

0.7012 mL

3.5061 mL

7.0121 mL

10 mM

0.3506 mL

1.7530 mL

3.5061 mL

50 mM

0.0701 mL

0.3506 mL

0.7012 mL

体外 PI3Kγ 激酶试验:
人PI3Kγ (100 ng)在室温下与激酶缓冲液(10 mM MgCl2，1 mM β-甘油磷酸盐，1 mM DTT，0.1 mM Na3VO4，0.1% 胆酸钠和15 M ATP/100 nCi γ[33]ATP，终浓度)和包含18 M PtdIns与250 M PtdSer (终浓度)的脂囊泡，以及AS-252424 或DMSO进行培养。激酶反应通过加入250 g新霉素-包被的闪烁迫近分析(SPA)珠停止。

细胞实验：

• Cell lines:HepG2 Ntcp 和 Huh7-Ntcp 细胞
• Concentrations:2.5 μM
• Incubation Time:2 – 4 小时
• Method:肝细胞培养物用稀释剂(DMSO)，25 μM TLC，250 μM TCDC，50 μM GCDC，或50 ng/ml Fas处理2-4小时，HepG2-Ntcp和Huh7-Ntcp细胞用DMSO，20 μM TLC，75 μM TCDC或GCDC，200 μM etoposide或200 ng/ml TNFa 和28 ng/ml actinomycin D处理2-4小时。凋亡细胞数量使用荧光着色法测定，并表示为细胞百分比。人细胞系中的细胞凋亡通过测定caspase-3/-7活性确定，大鼠肝细胞中的细胞凋亡通过蛋白印迹法检测caspase-3的17 kDa蛋白裂解片段确定；等量蛋白质负荷通过肌动蛋白的蛋白印迹监测。

动物实验：

• Animal Models:RANTES(0.5 mg/kg 在200 ml 生理盐水中)或巯基乙酸盐(40 ml/kg)腹腔注射到C3H小鼠，以诱导产生腹膜炎小鼠模型。
• Formulation:AS-604850溶于载体(0.5% 羧甲基纤维素/0.25% Tween-20)，并将溶液调节为10 mL/kg体重。
• Dosages:对RANTES为 0，1，3，10 或 30 mg/kg，对巯基乙酸盐为 10 mg/kg
• Administration:注射 RANTES或巯基乙酸盐之前30或15分钟口服给药