BGT226 (NVP-BGT226)

BGT226 (NVP-BGT226)是一种新型I型PI3K/mTOR抑制剂，作用于PI3Kα/β/γ，IC50为4 nM/63 nM/38 nM

靶点

体外研究

生长抑制实验显示NVP-BGT226具有抗肿瘤活性。NVP-BGT226显著抑制细胞生长，IC50 < 20 nM。NVP-BGT226在纳摩尔浓度时也诱导癌细胞凋亡，IC50≤25 nM。NVP-BGT226抗增殖和促凋亡效果不依赖于bcr-abl状态。NVP-BGT226抑制AKT/mTOR信号通路激活，这种作用存在浓度和时间依赖性。流式细胞仪分析显示细胞在G(0)-G(1) 期累积，随后在S期减少。NVP-BGT226 作用于测试细胞包括SCC4, TU183和KB细胞系，有效抑制生长，IC50为7.4到30.1 nM。NVP-BGT226处理表达PIK3CA突变 H1047R的Detroit 562和HONE-1细胞，也有效抑制生长。 此外, NVP-BGT226作用于HONE-1细胞和抗cisplatin细胞的效果差不多。端脱氧核苷酸转移酶调节的dUTP缺口末端标记法（法）(TUNEL) ，及caspase 3/7 和PARP分析，说明 NVP-BGT226通过凋亡路径诱导细胞死亡。NVP-BGT226通过微管相关蛋白轻链3B-II的凝聚和上调，及p62的降解，诱导自噬。Beclin1的基因沉默或与自噬体抑制剂, 3-methyladenine一起处理,抑制 NVP-BGT226诱导的自噬，且恢复菌落存活 。NVP-BGT226在纳摩尔浓度时作用于常见骨髓瘤细胞系和原代骨髓瘤细胞(如NCI-H929, U266, RPMI-8226和OPM2多发性骨髓瘤细胞系)，抑制生长，这种作用存在时间和剂量依赖性。NVP-BGT226抑制蛋白激酶B(Akt), P70S6k和4E-BP-1磷酸化，这种作用存在时间和剂量依赖性。NVP-BGT226完全抑制胰岛素类生长因子 1, 白细胞介素-6，和HS-5 基质细胞的条件培养基对骨髓瘤细胞生长的刺激作用。NVP-BGT226 可作为治疗多发性骨髓瘤的新型候选药。NVP-BGT226有效诱导凋亡和 抑制增殖。

体内研究

NVP-BGT226作用于移植瘤动物模型，明显延迟肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性，且伴随着抑制 p-p70 S6激酶细胞质表达和自噬小体形成 。NVP-BGT226 作用于FaDu细胞移植瘤鼠模型，抑制肿瘤生长，这种作用存在剂量依赖性。NVP-BGT226 按 2.5 和 5 mg/kg剂量口服处理三周，在第21天，与对照组相比，引起肿瘤生长分别下降34.7%和76.1% 。NVP-BGT226与rapamycin 相比，抑制肿瘤生长效果更好一些。NVP-BGT226处理组肿瘤最终体积明显比LY294002处理组和对照组小很多。

IC-87114

MB5532

BYL719

MB3572

CAY10505

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.5370 mL

7.6852 mL

15.3704 mL

5 mM

0.3074 mL

1.5370 mL

3.0741 mL

10 mM

0.1537 mL

0.7685 mL

1.5370 mL

50 mM

–

–

–

• Cell lines:NCI-H929, U266, RPMI-8226和OPM2多发性骨髓瘤细胞
• Concentrations:20-250 nM
• Incubation Time:36小时
• Method:NCI-H929,U266,RPMI-8226和OPM2多发性骨髓瘤细胞按每孔1.5×104个细胞接种在96孔板上，孔中有含10% FBS的RPMI培养基。36小时后, 加入BrdU标签溶液(终浓度为10 µM), 细胞在湿润环境下再培养12小时(37oC/5% CO2)。然后在300 g转速下离心10分钟, 除去上清液。然后在60oC烘干2小时。用乙醇/HCl在-20oC下固定30分钟,用核酸酶在37oC下处理30分钟，DNA部分被消化。细胞用培养基冲洗三次，然后与anti-BrdU-POD标签溶液在37oC下温育30分钟。移除anti-POD溶液细胞用冲洗buffer冲洗三次。加入ABTS底物溶液，使用酶标仪在405 nm测定吸光值。

动物实验：

• Animal Models:携带人类FaDu移植瘤的鼠
• Formulation:90% N-甲基-2-吡咯烷酮(NMP)/10% PEG300
• Dosages:5 mg/kg，处理三周
• Administration:口服处理