Lomibuvir (VX-222, VCH-222)

Lomibuvir (VX-222, VCH-222)是一种新型的，有效的，选择性的HCV聚合酶抑制剂，IC50为0.94-1.2 μM，作用于突变型M423T效果低15.3倍，作用于突变型I482L效果低108倍。

特性

VX-222是新型有效和选择性的非核苷聚合酶抑制剂，作用于C型肝炎病毒(HCV) RNA依赖的RNA聚合酶。

靶点

体外研究

VX-222结合到HCV RNA依赖的RNA聚合酶的II节变构袋处。VX-222选择性抑制HCV NS5B 基因型1a和1b，为非竞争性抑制剂,作用于NS5B 2a和人类DNA聚合酶时，IC50分别为0.94和1.2 μM。 VX-222选择性抑制HCV基因型1a和1b，EC50分别为22.3和11.2 nM。最新研究显示VX-222抑制1b/Con1 HCV次基因复制子, EC50为 5nM。VX-222优先抑制引物依赖的RNA合成，对重新开始的RNA 合成没有或很弱的抑制效果。

体内研究

VCH-222作用于小鼠和犬，显示好的药物动力谱,包括低的身体清除能力和极好的生物口服有效性，及好的ADME 能力。VCH-222 通过一些酶 (CYP1A1, 2A6, 2B6, 2C8, CYP 3A4, UGT1A3)进行生物转换，在肝脏中很好地转运，在胆汁进行分泌，或者形成葡糖甘酸加合物。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2441 mL

11.2206 mL

22.4411 mL

5 mM

0.4488 mL

2.2441 mL

4.4882 mL

10 mM

0.2244 mL

1.1221 mL

2.2441 mL

50 mM

0.0449 mL

0.2244 mL

0.4488 mL

NS5B抗体活性实验:
使用同源多聚RNA模板/引物多聚rA/寡聚dT，测定新合成RNA中放射标记的UTP渗透到酶C端∆21截断倒位中的数量，而测定VX-222 作用于HCV NS5B的抑制效果。使用液态闪烁计数器定量分析渗透的放射活性。使用NS5B的C端∆21截断倒位测定VX-222抑制HCV NS5B基因型1b的体外动力学。加入10-75 μM非放射性的UTP，与 0.89- 6.70 μCi [α-33P]标记的UTP混合，测定VX-222 (1-1.5 μM)。RNA依赖的RNA合成反应在22oC下进行18分钟。

细胞实验

• Cell lines:Huh7.5细胞
• Concentrations:0.01 nM -10 μM
• Incubation Time:48小时
• Method:含HCV RNA复制子的Huh7.5细胞胰蛋白酶化，按每孔4×104个细胞接种到48孔板上。第二天更换培养基，VX-222加到200 μL完全培养基中。48小时后，全部RNA被萃取,使用RT-PCR测定病毒 RNAs。使用对数曲线.通过回归曲线分析计算降低50%HCV RNA复制子水平(EC50)时的有效VX-222浓度。

动物实验

• Animal Models:鼠或犬
• Formulation:溶于30% PEG
• Dosages:5 mg/kg(鼠)，或10 mg/kg(犬)
• Administration:口服饲喂