考马斯亮蓝R250

考马斯亮蓝R250；Brilliant Blue R
分子式：C45H44N3NaO7S2 分子量：825.97
简介：考马斯亮蓝R250（Coomassiebrilliant blue R250），本品染色灵敏度比氨基黑高5倍。尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色。但蛋白质浓度超出一定范围时，对高浓度蛋白的染色不符合Beer定律，用作定量分析时要注意这点。考马斯亮蓝R-250是通过范德瓦尔键与蛋白质结合，尤其适用于SDS电泳微量蛋白质染色。它与不同蛋白质结合呈现出基本相同的颜色，并且在比较宽的范围内，扫描峰的面积与蛋白量呈线性关系。
别名：考马斯亮蓝R250 ;考马斯亮兰R250，酸性蓝83，酸性艳蓝6B，考马斯亮蓝R ;Coomassie® Brilliant Blue R-250 Brilliant blue R-250 Acid Blue 83 Acid Cyanine 6B Alizarin Rubinol 5G Solar Cyanine 6B Brilliant indocyanin 6B Coomassie® Brilliant Blue R C.I. 42660
物理性状及指标：
外观：……………………暗波尔多红至暗紫棕色固体
溶解性：…………………Water：10mg/ml warmed
熔点：……………………174-180℃
最大吸收波长：…………586-592nm（乙醇）
储存条件：常温，避光防潮密闭干燥

运输条件：常温运输

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用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。本品为在SDS-PAGE中用于蛋白质分析的三苯甲烷染料，还可以广泛应用于布拉德福德(Bradford)蛋白质定量反应。
使用方法推荐
考马斯亮蓝染色法也称考马斯蓝法(coomassie blue staining)又称Bradford法。是测定蛋白质含量属于染料结合法的一种。由于其突出的优点，正得到越来越广泛的应用。
考马斯亮蓝染色液R250配方（100ml）:
考马斯亮蓝R250 0.25g
甲醇 45ml
冰醋酸 10ml
ddH2O 45ml
考马斯亮蓝脱色液配方：
甲醇 250ml
冰醋酸 80ml
ddH2O定容至1000ml。
考马斯亮蓝染色&脱色步骤：
1 电泳结束后，切取少量含有MARK蛋白以及少许样品的小部分凝 胶进行染色，其余部分用保鲜膜包好，放在4℃冰箱保存。 取凝胶放入适量考马斯亮蓝染色液中，确保染色液可以充分覆盖凝 胶。置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温染色1小时或更长时 间。 注：具体的染色时间取决于凝胶的厚度和染色时的温度。凝胶较厚， 温度较低，则染色时间宜适当延长。凝胶较薄，温度较高，则染色时 间可以适当缩短。通常染色至凝胶的颜色和染色液的颜色非常接近， 在染色液中几乎看不清凝胶时，可以认为已染色充分。染色2-4 个小 时或更长时间不会对最终的染色效果产生负面影响。
2 倒出染色液。染色液可以回收重复使用至少2-3 次。
3 加入适量考马斯亮蓝染色脱色液，确保脱色液可以充分覆盖凝胶。 置于水平摇床或侧摆摇床上缓慢摇动，室温脱色 4-24 小时。期间更换脱色液2-4 次，直至蓝色背景基本上全部被脱去，并且蛋白条带染 色效果达到预期。通常蛋白条带在脱色1-2 小时后即可出现。 注：脱色期间可以在脱色液中加入一片吸水纸，可以使部分染料吸附 在吸水纸上，加快脱色。脱色时间过长也会导致蛋白条带的颜色变浅。
4 完成脱色后，用ddH2O浸泡，至于未染色凝胶长度相等时，参照蛋白标准，与未染色凝胶对比，切下所需蛋白成分的凝胶，收集起来。然后把所要提纯的蛋白从凝胶中分离出来。
【注意】
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