WZ3146

WZ3146是一种突变选择性的，不可逆EGFR(L858R)和EGFR(E746_A750)抑制剂，IC50分别为2 nM和2 nM；对ERBB2磷酸化(T798I)没有抑制作用。

特性

Mutant-selective, irreversible.

靶点

体外研究

WZ3146 作用于Ba/F3细胞，选择性抑制EGFR L858R, EGFR E746_A750, EGFR L858R/T790M 和 EGFR E746_A750/T790M 磷酸化，IC50分别为2 nM, 2 nM, 5 nM 和14 nM。WZ3146 显著抑制含EGFR 突变的细胞系生长，作用于含 EGFR Del E746_A750的 HCC827细胞时，IC50 为 3 nM ，作用于含EGFR Del E746_A750 的 PC9 细胞，IC50为15 nM，作用于含EGFR L858R/T790M 的H1975细胞，IC50为29 nM，作用于含EGFR Del E746_A750/T790M 的PC9 GR细胞，IC50为3 nM。

Semaxanib(SU-5416 )

MB3985

TAK-285

MB3995

Telatinib

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1508 mL

10.7538 mL

21.5077 mL

5 mM

0.4302 mL

2.1508 mL

4.3015 mL

10 mM

0.2151 mL

1.0754 mL

2.1508 mL

50 mM

0.0430 mL

0.2151 mL

0.4302 mL

体外抑制酶动力学分析1:
使用ATP/NADH耦合实验系统，在96孔板上进行实验，实验重复进行3次。终反应混合物含0.5 mg/mL 牛血清蛋白(BSA), 2 mM MnCl2, 1 mM 磷酸烯醇式丙酮酸 (PEP), 1 mM TCEP, 0.1 M Hepes 7.4, 2.5 mM 聚-[Glu4Tyr1] 肽, 1/50 终反应体积丙酮酸激酶/兔肌肉中的乳酸脱氢酶,0.5 mM NADH, 0.5 μM EGFR激酶 ,100 μM ATP及不同量WZ3146。WZ3146和ATP混合，从混合物中取出，与所有其他成分制作独立储液，然后加到后者中，开始反应。从A340曲线的斜率绘制稳态初始速度数据。

细胞实验

• Cell lines:NSCLC 和Ba/F3
• Concentrations:0 到10 μM
• Incubation Time:72 小时
• Method:通过MTS实验测定生长和生长抑制情况。WZ3146处理NSCLC或 Ba/F3细胞72小时，测定每组实验的细胞数。所有实验点设立6到8孔，所有实验至少重复进行3次。使用GraphPad Prism version 5.0软件在Windows系统中绘制数据图形。使用非线性回归模型绘制S型剂量反应曲线。