CHIR-99021 (CT99021) HCl；CHIR-99021 HCl
分子式：C22H18Cl2N8.HCl 分子量：501.8
简介：CHIR-99021 (CT99021) HCl是CHIR-99021的盐酸盐, 是GSK-3α/β抑制剂，IC50为10 nM/6.7 nM。其对GSK-3的选择性比对Cdc2和ERK2高500倍以上。
物理性状及指标：
外观：………………粉末
溶解性：……………DMSO 100 mg/mL (199.28 mM);Water Insoluble;Alcohol 47 mg/mL (93.66 mM)
含量：………………>99%

储存条件：-20℃，避光防潮密闭干燥

运输条件：2~8℃运输
生物活性

产品描述

CHIR-99021 (CT99021) HCl是CHIR-99021的盐酸盐,是GSK-3α/β抑制剂，IC50为10 nM/6.7 nM。其对GSK-3的选择性比对Cdc2和ERK2高500倍以上。

靶点

GSK-3β (Cell-free assay)	GSK-3α (Cell-free assay)
6.7 nM	10 nM

体外研究

CHIR-99021作用于GSK-3比作用于其最接近的同系物CDC2和ERK2，及其他蛋白激酶选择性高500倍。此外，CHIR-99021只与一组22种药理相关的受体微弱结合，且对一组23种非激酶的酶几乎没有抑制活性。CHIR-99021作用于表达胰岛素受体的CHO-IR细胞，诱导糖原合成酶(GS)激活，EC50为0.763 μM。CHIR-99021(3 μM)作用于3T3-L1前脂肪细胞，除了模拟胰岛素的作用，抑制GSK-3，使胞内游离β-catenin增加1.9倍，模仿经典Wnt信号通路。在分化的前3天，CHIR-99021处理，抑制脂肪细胞分化，IC50为0.3 μM，通过抑制CCAAT/增强子结合蛋白α（C/EBPα）和过氧化物酶体增殖物激活受体γ（PPARγ）的诱导作用。不像LiCl和AR-A014418，CHIR-99021处理，即使在高浓度，不会降低INS-1E细胞活力。相反，CHIR-99021增加INS-1E细胞增殖，这种作用具有剂量依赖性，且显著抑制高糖和高棕榈酸诱导的INS-E细胞死亡，这种作用具有浓度依赖性。CHIR-99021浓度低至1 μM，处理离体大鼠胰岛，促进β细胞复制，5 μM CHIR-99021处理，使细胞复制增长2-3倍。

体内研究

CHIR-99021按30 mg/kg剂量口服处理患2型糖尿病的啮齿类动物模型，增强葡萄糖代谢，处理3-4小时后，最大血浆葡萄糖减少近150 mg/dl，而血浆胰岛素保持或低于对照水平。CHIR-99021按16或48 mg/kg剂量口服给药ZDF大鼠，1小时后，再口服葡萄糖，显著改善糖耐量，16 mg/kg和48 mg/kg处理组的血浆葡萄糖分别减少14％和33％，较高剂量CHIR-99021处理，再口服葡萄糖，还可以降低高血糖。CHIR-99021处理移植小鼠或人造血干细胞（HSC）的受体小鼠，显著增强造血重建功能，说明GSK-3是一种特异性的HSC活性调节剂。

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用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。本品是CHIR-99021的盐酸盐, 是GSK-3α/β抑制剂，其对GSK-3的选择性比对Cdc2和ERK2高500倍以上。可用于相关领域的科学研究。

储液配置

浓度/体积/质量(DMSO)	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	1.9928 mL	9.9641 mL	19.9283 mL
5 mM	0.3986 mL	1.9928 mL	3.9857 mL
10 mM	0.1993 mL	0.9964 mL	1.9928 mL
50 mM	0.0399 mL	0.1993 mL	0.3986 mL

经典实验操作（仅供参考）

激酶实验

无细胞激酶实验:

聚丙烯96孔板中每孔充满了含27 nM GSK-3α 或 29 nM GSK-3β, 和 0.5 μM 生物素-CREB 肽底物的300 μL 缓冲液 (50 mM Tris HCl, 10 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM 二硫苏糖醇, 25 mM β-glycerophosphate, 1 mM NaF, 0.01% BSA, pH 7.5) 。各种浓度CHIR-99021加入3.5 μL DMSO中，随后加入50 μL ATP储存液，使所有无细胞实验中ATP终浓度为1 μM。温育后，100 μL等分试样按一式三份转移至每孔含100 μL 50 μM ATP和 20 mM EDTA的Combiplate 8孔板中。1小时后，使用用PBS将孔洗涤5次，填充200 μL闪烁液，密封，放置30分钟后，然后在闪烁计数器中计数。所有步骤在室温下进行。

细胞实验

Cell lines:INS-1E
Concentrations:溶于DMSO, 终浓度为20 μM
Incubation Time:1, 或 4 天
Method:

细胞在饥饿培养基（只含5mM葡萄糖，1％胎牛血清）中维持24小时。然后使用不同浓度的CHIR-99021处理细胞的1天或4天。通过使用CyQuant染料进行细胞DNA染色，测量细胞数，当结合DNA就会发出荧光。温育30分钟后，使用FLUOstar Optima酶标仪测量荧光。通过BrdUrd掺入法测定细胞复制。最后4小时，BrdUrd标记溶液加入到培养基中，然后使用FixDenat溶液固定细胞，与单克隆anti-BrdUrd-POD抗体温育。每孔加入底物溶液后，在微孔板发光检测仪上使用Analyst HT检测系统测量光发射。

动物实验

Animal Models:雌性db/db小鼠或雄性2型糖尿病ZDF大鼠
Formulation:在20mM柠檬酸盐缓冲的15％Captisol中配制成溶液，或在0.5％羧甲基纤维素中配制成悬浮液
Dosages:~48 mg/kg
Administration:口服处理

【注意】
●我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
●部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。

规格	5mg, 25mg

CHIR-99021(CT99021)HCl

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