meilunbio®离子荧光探针

meilunbio®提供丰富的钙离子，氯离子，锌离子等常用的检测细胞内离子荧光探针，可满足绝大多数荧光设备检测。

钙离子荧光探针

Cal-520™在探测细胞内钙离子方面提供了一个卓越的荧光分析工具。 Cal-520™AM 是新型的钙离子荧光染料相比现在还在应用的绿色钙离子荧光指示剂（例如 Fluo-3 AM 和 Fluo-4 AM）在信噪比和细胞内滞留方面有着显著的改进。

Fura-2 AM 是细胞生物学常用的一种钙离子荧光探针，能特异性地结合 Ca²⁺（结合比例为 1:1），同时可发出荧光，结合 Ca²⁺后的最大激发波长从结合前的 380 nm向 340 nm（Ca²⁺饱和时）偏移，其发射荧光强度与结合 Ca²⁺的浓度存在定量关系。一般用 340nm 和 380nm 波长激发 Fura-2，通过使用与两种激发对应的荧光强度比率来计算细胞内的钙离子浓度，这种比率测量方法可以消除不同细胞样品间荧光探针装载效率的差异，荧光探针的渗漏，细胞厚度差异等一些误差因素。

Fura-2 与 Indo-1 已成为目前使用最广泛的比率测量的钙荧光指示剂。目前适用于Fura 2 实验的设备有很多，但 Fura-2 特别适合于数字成像显微镜，使用该设备可更方便的调整激发波长，使探针结合钙离子后在 300-400 nm 的激发波长范围内扫描 Fura-2 的吸收偏移，在 510 nm 处检测发射波长。由于 Fura-2 是极性大的酸性化合物，无法进入细胞内，为此在其负性基团上结合乙酰氧甲酯，使其成为 Fura-2/AM，该变化既增加了酯溶性又消除了负电荷，极大的提高了细胞渗透性。在细胞内，Fura-2/AM被酯酶水解成 Fura-2 后可与胞浆游离 Ca²⁺可逆性结合。

由于线粒体内高钙离子浓度，Rhod-2 AM 钙离子荧光探针可以用来标记线粒体内钙离子，同时也可作为线粒体荧光探针。

锌离子荧光探针

锌离子存在于内稳态、免疫反应、氧化应激、凋亡和衰老中。锌已经被接受的功能包括传统的突触前神经元神经递质以及转运到突触后神经元的跨膜信号。异常的锌代谢通常伴随神经学上的疾病，包括老年痴呆，帕金斯病和癫痫。大多数适合体内锌测定的技术已经通过荧光成像所证明。

TSQ 与 Zn 离子结合后，吸收波长和发射波长分别位于 334nm 和 495nm，在495nm 处可以发出很强的荧光。作为一个中性 pH 值的荧光探针，它已经被证明是一个具有很好的选择性、无毒的荧光探针。TSQ 的水溶性不是很好，这使它不适合在活组织中对锌进行测定和成像。

Zinquin /Zinquin AM 是细胞内 Zn²⁺选择性荧光探针，发射强烈的蓝色荧光。Zinquin不可以透过细胞膜，但是 Zinquin AM 可以。它们以 1:1 或 2:1 的比例形成 zinquin-Zn²⁺复合物（Kd 值分别为 370 和 850 nM）。

Zinquin 乙酯是被广泛使用的 TSQ 指示剂的类似物。虽然 Zinquin 乙酯自身也有荧光，但是它自身的荧光强度几乎可以忽略不计（1/30）。Zinquin 乙酯像其它的乙酰甲酯类的钙离子指示剂，如 Fura 2-AM 和 Fluo 3-AM 一样，都可以通过细胞膜。Zinquin乙酯也因此可以被用来检测细胞内的锌离子的情况。它结构中的氮原子能和锌离子形成复合物，也能和镉离子形成荧光复合物。然而，正常细胞内很少的镉离子很难达到可以被检测出来的浓度。由于 Zinquin 乙酯的水溶性非常差，需要用二甲基亚砜（DMSO）或者乙醇来制备它的储存液。

氯离子荧光探针

MQAE 是使用最广泛的一种新型氯离子荧光探针。MQAE 以氯离子为配对阴离子，当氯离子浓度升高时，MQAE 的荧光强度随着氯离子浓度的增加而成比例地减少。在氯离子浓度低于 50mM 时，MQAE 的荧光强度几乎不受 pH 变化的影响。MQAE 的检测灵敏度比 SPQ 更高，并且荧光效果也比 SPQ 要好一些。

MQAE 的工作液可以配制于 Krebs-HEPES 缓冲液中。Krebs-HEPES 缓冲液即为20mM HEPES，128mM NaCl，2.5mM KCl，2.7mM CaCl₂，1mM MgCl₂，16mM 葡萄糖，pH7.4。MQAE 标记细胞时的浓度通常为 5-10mM。以约 800-1000 万细胞每毫升的细胞密度，在含有 5-10mM MQAE 的 Krebs-HEPES 缓冲液中孵育 30-60 分钟。通常一个探针的装载体系为 100 微升即可。随后用 Krebs-HEPES 缓冲液或其它适当溶液洗涤 5 次左右，即可进行相应荧光测定。

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