CCK-8两个波长都要测吗？ 需要怎样计算?
只测450nm下的OD值：
细胞存活率 = [(As – Ab)／(Ac – Ab)] ×100%
抑制率 = [(Ac – As)／(Ac – Ab)] ×100%
As：实验孔（含有细胞的培养基、CCK-8、待测药物）的吸光度
Ac：对照孔（含有细胞的培养基、CCK-8、没有待测药物）的吸光度
Ab：空白孔（不含细胞和待测药物的培养基、CCK-8）的吸光度。
每次测定的数值不一样，是什么原因？如何解决？
可能会有以下几个原因：- 当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误差。一般情况下，最外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用；
- 有可能会因为CCK-8沾在壁上而产生误差，建议在加入CCK-8后，轻轻敲击培养板以帮助混匀；
- 每孔的细胞数量过多或过少。请预先在1,000~100,000个/孔范围内摸索条件；
- 重复试验请保证孵育时间、接种细胞数相同。
CCK-8会导致细胞死亡吗？
CCK-8本身对细胞毒性特别小，作用时间长不会导致细胞都死亡，但是细胞长满了，本身代谢会引起细胞死亡。
CCK-8除了用酶标仪还可以用什么仪器？紫外分光光度计行么？
一般cck都是用酶标仪，紫外分光光度计最好不用，因为紫外我没记错一次只能测一个孔吧，而且还得把孔内液体吸出来到紫外用的皿里，而且检测时间很长，CCK-8对孵育时间敏感，这样误差太大了。
OD值偏高？
可以确认下培养时间，一般肉眼可见颜色变化即可检测。
做CCK-8经常有气泡，对吸光度有影响，有什么办法去除么？
有气泡，没办法去除，但是可以避免有气泡，加药什么的枪头抵着孔壁，慢点加液体，基本不会产生气泡。
细胞能一边培养一边检测？
培养一段时间测CCK-8，然后换液后可以接着养。
反映时间怎么确定？数值必须是1么？
0.1-2.5都可以，最佳是1.0左右。
如何设定空白对照？
在不含细胞的培养基中加入CCK-8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验(细胞毒性实验)时，还应考虑药物的吸收，可在不含细胞，加入药物的培养基中加入CCK-8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度作为空白对照。
铺板细胞量有什么要求吗？
96孔板细胞计数的时候一般是10的4次方，我们铺96孔板，细胞浓度是5×104，取100ul铺板;可以您自己对细胞计数，保证每孔细胞数量一致。或者可以计数，方法：按不同细胞数铺板，贴壁后加CCK-8，孵育1小时，然后检测，OD值在1.5左右是最佳铺板数。
哪些物质会影响CCK-8的测定？
当有氧化还原性物质存在时会影响CCK-8的测定，因此当所加药物为氧化还原性物质时需要换液再进行检测。
CCK-8对于不同的细胞，灵敏度是否一样？
不一样，悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色。对于贴壁细胞，一般加入CCK-8培养0.5-4小时吸光度已经很高，但对于悬浮细胞则可能吸光度较低，可以通过延长CCK-8的加入时间或增加细胞数量来解决。