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概览

理论原理

GUS 染色试剂盒(GUS StainingKit) 采用经典的组织化学方法，通过与底物的颜色反应来对植物中 gus 基因融合标记进行快速检测。

所需仪器及主要耗材

仪器：光学显微镜
耗材：载玻片，盖玻片

方法评价

针对植物应用较多，在其他种属中内源活性较高。

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GUS 染色试剂盒 (GUS Staining Kit) 采用经典的组织化学方法，通过与底物的颜色反应来对植物中 gus 基因融合标记进行快速检测。gus 基因存在于大肠杆菌 E.coli 等一些细菌基因组内，其表达产物β-葡萄糖苷酸酶 (GUS，β-glucuronidase，β-D-葡萄糖苷酸酶)是一种水解酶，能催化许多β-葡萄糖苷酯类物质的水解。因为绝大多数植物细胞内不存在β-葡萄糖苷酸酶的背景活性，因此 gus 基因是转基因植物最常用的报告基因之一，尤其是在研究外源基因瞬时表达的转化实验中被广泛应用。β-葡萄糖苷酸酶可以将 5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X-Gluc）分解为蓝色的不溶物质，因此用含有 X-Gluc 底物的染色液浸泡转 gus 基因植物，具有 GUS 活性的部位或位点呈现蓝色或蓝色斑点，可用肉眼或显微镜观察到。其检测方法简单、快速、灵敏、稳定，且背景活性低。

本试剂盒包含 GUS 染色的全部试剂，使用方便，只需将配制好的 X-Gluc 溶液和染色缓冲液按照比例混合即配成 GUS 染色液。该试剂盒可以配制 50ml 的 GUS 染色液。

产品	萤光素酶	底物	发光类型	检测方法	灵敏度	适用范围
MA0420	GUS(β-葡萄糖苷酸酶)	5-溴-4-氯-3-吲哚-β-葡萄糖苷酸酯（X-Gluc）	显色（变蓝）	显微镜观察	高	植物

应用交流

优点：
1) 灵敏度好
2) 植物中内源活性低
缺点：
1) 90% 的 E.coli、人／动物细胞中有内源活性
2) 酶的扩散可引起 “过度报告”
3) 需要底物

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