产品描述
本试剂盒提供了一种简单、方便的从培养细胞或新鲜组织中抽提核蛋白与浆蛋白的方法。约90分钟就可以完成培养细胞的核蛋白与浆蛋白的分离。抽提得到的蛋白为非变性、有活性的,可以用于Western、EMSA、footprinting、报告基因检测以及酶活力测定等后续操作。
本试剂盒的抽提原理是,通过CER A和CER B在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀后破坏细胞膜,释放出浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的NER抽提得到核蛋白。
对于细胞样品,本试剂盒可以抽提50个,数量为2×106个Hela细胞(约40mg)的样品;对于组织样品,如果每个样品的重量不超过30mg,本试剂盒可以抽提50个样品,如果每个样品约为30-60mg,本试剂盒大约可以抽提37个样品。可根据需要按比例放大或缩小提取规模。
本试剂盒的抽提原理是,通过CER A和CER B在低渗透压条件下,使细胞充分膨胀后破坏细胞膜,释放出浆蛋白,然后通过离心得到细胞核沉淀。最后通过高盐的NER抽提得到核蛋白。
对于细胞样品,本试剂盒可以抽提50个,数量为2×106个Hela细胞(约40mg)的样品;对于组织样品,如果每个样品的重量不超过30mg,本试剂盒可以抽提50个样品,如果每个样品约为30-60mg,本试剂盒大约可以抽提37个样品。可根据需要按比例放大或缩小提取规模。
产品优势
提取的胞核蛋白和胞浆蛋白产量高,交叉污染少;
整个操作过程只需要90分钟左右;
既可以用于培养细胞细胞核/浆蛋白的提取,也可以用于新鲜组织细胞核/浆蛋白的提取;
本试剂盒中试剂含有蛋白酶磷酸酶抑制剂,可避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解,保持蛋白质的完整性和天然活性。
整个操作过程只需要90分钟左右;
既可以用于培养细胞细胞核/浆蛋白的提取,也可以用于新鲜组织细胞核/浆蛋白的提取;
本试剂盒中试剂含有蛋白酶磷酸酶抑制剂,可避免蛋白酶和磷酸酶对蛋白质的降解,保持蛋白质的完整性和天然活性。
保存条件
-20℃保存,有效期一年。
操作方法
请参考说明书。
注意事项
1.需自备PMSF(美仑产品货号:MA0001),PMSF一定要在抽提试剂加入到样品前2-3分钟内加入,以免PMSF在水溶液中很快失效。
2.抽提蛋白的所有步骤都需在冰上或4℃进行。所用试剂都需要预冷或者即融,保证操作过程中的低温环境。
3.对于组织样品,本试剂盒仅适合于新鲜组织,对冻存过的组织抽提效果较差。可以抽提的组织样品数通常不足50个。
4.使用本试剂盒抽提得到的细胞核蛋白与细胞浆蛋白都可以直接用BCA蛋白定量试剂盒(美仑产品货号:MA0082)测定蛋白浓度。但不适合用Bradford法测定蛋白浓度。
5.为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
备注:库存情况可能有所变动,请与我们销售人员确认为准,价格情况请直接联系我们销售人员。