产品描述：
超强型CCK-8试剂盒（Super-Enhanced Cell Counting Kit-8）是一种基于WST-8用于细胞活力、增殖和细胞毒性的超快速、超高灵敏度检测的试剂盒。
CCK-8超强型溶液中含有WST-8（2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑单钠盐），是一种类似于MTT的化合物，它在电子耦合试剂1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓硫酸二甲酯（1-Methoxy PMS）存在条件下，可以被线粒体内的脱氢酶还原为具有高度水溶性的橙黄色甲瓒产物Formazan，生成的Formazan数量与活细胞的数量成正比。因此可利用这一特性直接进行细胞增殖和毒性分析，细胞增殖越多越快，则颜色越深；细胞毒性越大，则颜色越浅。
美仑超强型CCK-8试剂盒和普通或增强型CCK-8试剂盒相比，检测速度更快、灵敏度更高、线性范围更宽，仅需0.5至1小时即可完成检测，尤其适用于悬浮细胞。同时保持数据可靠、重现性好、稳定性好的特点，可以广泛应用于药物筛选、细胞增殖测定、细胞毒性测定、肿瘤药敏试验。
产品优势：
√ 数据可靠－与增强型CCK-8相比，灵敏度更高，线性范围更宽。
√ 操作简便－一瓶即用型试剂，无需融化，即开即用。
√ 试剂稳定性好－与增强型CCK-8一样，2-8℃保存即可。
√ 节省时间－反应速度更快，仅需0.5至1小时即可完成检测，尤其适用于悬浮细胞。
保存条件：2-8℃避光保存，自生产之日起12个月有效。-20℃可以储藏更久，但反复冻融会增加背景值，干扰实验测定，因此请将经常使用的试剂保存在2-8℃。
运输条件：湿冰运输（按季节）。
操作方法：详见说明书
注意事项：
1.建议先做几个孔摸索接种细胞的数量和加入CCK-8试剂后的培养时间。
2.CCK-8反应时间的确定：一般情况下，免疫细胞显色比较困难，因此需要增加细胞数量和延长CCK-8反应时间。悬浮细胞与贴壁细胞相比较难显色，因此悬浮细胞在加入CCK-8培养0.5-1小时后，可先从培养箱取出，目测或用酶标仪测定显色程度，若显色困难可以继续培养数小时后再确定。对于贴壁细胞，CCK-8的培养时间一般为0.5小时，在培养20分钟左右即可取出肉眼观察显色程度。
3.每孔接种细胞数：当使用标准96孔板时，贴壁细胞的最小接种量至少为1000个/孔（100μl培养基）。检测免疫细胞时的灵敏度相对较低，因此推荐接种量不低于2500个/孔（100μl培养基）。如果要使用24孔板或6孔板实验，请先计算每孔相应的接种量，并按照每孔培养基总体积的10%加入CCK-8溶液。
4.设定空白对照：在不含细胞的培养基中加入CCK-8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度即为空白对照。在做加药实验（细胞毒性实验）时，还应考虑药物的吸收，可在加入药物的培养基中加入CCK-8，培养一定的时间，测定450 nm的吸光度作为空白对照。
5.影响CCK-8测定的物质：由于CCK-8检测细胞活性的原理是通过检测活细胞脱氢酶催化的反应，所以如果待测体系中存在氧化还原物质则可能会干扰检测结果，还原性物质会使吸光度增加，氧化性物质会使吸光度减小，因此应需设法去除这些物质的影响。酚红和血清对本试剂盒的测定无明显影响，培养基中酚红的吸光度可以在计算时，通过扣除只含有培养基的对照孔中本底吸光度而消除，因此不会对检测结果造成影响。
6.测定波长：如果样品为高浑浊度的细胞悬液，建议采用双波长进行测定，检测波长450nm，参比波长600-650nm。如果没有450nm的滤光片，可以使用吸光度在430-490nm之间的滤光片，但是450nm检测灵敏度最高。
7.当在培养箱内培养时，培养板最外一圈的孔最容易干燥挥发，由于体积不准确而增加误差。一般情况下，最外一圈的孔只加培养基，不作为测定孔用。
8.如果细胞培养时间较长，培养基颜色发生变化，应洗涤细胞更换培养基后再加CCK-8检测。
9.CCK-8超强型溶液对细胞的毒性较低，细胞在检测后仍然可以正常生长，但为了避免CCK-8超强型溶液可能带来的对于后续检测的影响，除非该细胞极难获得，否则不推荐将检测后的细胞用于其它实验。
10.为了您的安全和健康，操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
数据展示：
方法：分别将HT-29、RAW 264.7、HL-60、THP-1、A549、Jurkat, Clone E6-1、K-562分别以50000个/孔、100000个/孔、200000个/孔进行倍比稀释，铺96孔板，待细胞贴壁后分别以10μl/孔加入美仑超强型CCK-8、美仑增强型CCK-8及B品牌超强型CCK-8，将96孔板放置于37℃二氧化碳培养箱中反应30-60min后，用酶标仪在450nm波长处检测吸光度。以细胞数为横坐标，吸光度为纵坐标，制作细胞活性的标准曲线。
结果：如下图所示，美仑超强型CCK-8细胞活性标准曲线斜率更高，灵敏度更高，线性良好，检测效果优于B品牌超强型CCK-8，明显优于美仑增强型CCK-8。尤其是悬浮细胞，在相同检测时间下，超强型CCK-8测得的吸光度可以达到增强型CCK-8的三倍以上。
