产品简介
本产品是一种高灵敏度、稳定、均质的海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒。本产品无需洗涤或收集细胞即可通过化学发光法直接测定细胞内海肾萤光素酶(sea pansy (Renilla reniformis) luciferase，简称Renilla luciferase)活性。在细胞培养板内加入与培养液等体积的检测试剂反应5分钟，即可进行化学发光检测。本试剂盒使用灵活便捷、检测灵敏度高、测定样品的线性范围宽，性能优于国内主要同类产品。另外，本产品也可以用于裂解并收集保存的细胞样品的检测。
本产品既可单独使用，直接裂解细胞检测细胞中海肾萤光素酶活性；也可与萤火虫萤光素酶活性检测试剂盒共同使用进行一体化的双萤光素酶检测。本试剂盒为即配即用型试剂，集细胞裂解、海肾萤光素酶检测于一体，通过“加入-混合-检测”免去了先裂解后检测的实验步骤，而且稳定的“辉光”更适合高通量样品的检测。
反应原理如下：
产品优势
1、本产品操作便捷，读数稳定，检测速度快：本产品集细胞裂解、海肾萤光素酶检测于一体，只需要加样-读板，即可完成实验。产生的光信号半衰期近乎1 h，发光信号稳定。
2、使用灵活便捷，适用范围广：本产品发光信号稳定，既适用于少量样品的检测，也适用于大量样品的高通量筛选。
3、本产品可与萤火虫萤光素酶活性检测试剂盒共同使用：本产品可以抑制99.9%以上的萤火虫萤光素酶催化的发光信号，不仅可以单独检测细胞中的海肾萤光素酶活性，也可作为内参，与萤火虫萤光素酶活性检测试剂盒共同使用进行一体化的双萤光素酶检测。
4、兼容性强：本产品兼容各种常见培养液，正常培养液中的酚红、10%以内的胎牛血清或小牛血清、2%以内的DMSO或乙醇对信号和稳定性基本没有影响，常用的盐类或金属离子在正常浓度下也基本没有影响。
保存条件
未开封试剂盒-20℃保存，自生产之日起12个月有效。
运输条件
干冰运输。
注意事项
- 检测仪器选择：能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测，但是针对相同的样品，不同检测器本底信号值和测量值均可能不同；且对于同一样本检测，不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰，推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
- 由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响，所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
- 酶促反应对温度较为敏感，加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。
- 如需同时检测多个细胞培养板，请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致，再进行数据读取，以此获得最佳的检测结果。
- Renilla萤光素酶检测底物（100×）配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发，有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况，此时用无水乙醇把体积补足至包装规格，并混匀后即可使用。
- 海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为480 nm。
数据展示：
（1）Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
方法：分别将293T细胞和CHO-K1细胞表达的Renilla萤光素酶稀释不同倍数，检测MA0524及竞品Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒纯酶水平发光稳定性及线性拟合情况。
结论：本公司开发产品的发光强度略高于竞品；产品检测半衰期与竞品相近，约1h；本产品单一时刻光强-Renilla萤光素酶浓度标曲线性良好（R2=0.999）。不同种类细胞表达的酶亮度与稳定性存在差异。
图1. 293T细胞表达的Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
图2. CHO-K1细胞表达的Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
（2）细胞内Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
方法：细胞培养体系下验证光强稳定性及细胞密度-光强标曲。将Renilla萤光素酶载体瞬时转入293T细胞/CHO-K1细胞，24h后分别使用MA0524及竞品Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒检测细胞水平发光稳定性（50000个细胞/孔）及线性拟合情况。
结论：本公司开发产品的发光强度略高于竞品；产品检测半衰期与对照相近，约1h；本产品单一时刻光强-Renilla萤光素酶浓度标曲线性良好（R2=0.998/0.999）。不同种类的细胞亮度与稳定性存在差异。
图3. 293T细胞内Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
图4. CHO-K1细胞内Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
（3）在哺乳动物细胞多种培养基中检测Renilla萤光素酶发光信号
方法：将Renilla萤光素酶稀释在多种培养基中，与Renilla Luciferase检测工作液1：1混合后，检测发光信号。用DMEM培养基进行数据归一化。
结论：本Renilla萤光素酶报告基因体系兼容多种培养基。
图5. 本产品在不同培养基中发光检测情况