产品简介
本产品是一种检测海洋动物海肾 (Renilla reniformis) 萤光素酶的快速灵敏的方法。此系统是除萤火虫 (Photinus pyralis) 报告基因系统以外的另一选择。本试剂盒使用灵活便捷、检测灵敏度高、测定样品的线性范围宽,性能优于国内外主要同类产品,非常适合于某些微量表达海肾荧光素酶的实验体系。
反应原理如下:
产品优势
1、本产品发光强度高:本产品的检测灵敏度显著优于国内外同类产品,特别适合海肾萤光素酶表达量低的样品。
2、本产品稳定性强:本产品37℃保存1天,室温保存7天,检测效果下降不超过10%。
海肾萤光素酶报告基因产品对比
美仑的三款海肾萤光素酶报告基因检测试剂盒的主要特点和差异如下。
如果对发光信号要求非常高,可以立即进行检测,推荐使用MA0525 Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(闪光型);如果对发光信号和稳定性都有要求,需要批量或连续操作,推荐使用MA0524 Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(标准型);如果对发光信号有一定要求,推荐使用MA0526 Renilla萤光素酶报告基因检测试剂盒(辉光高亮型)。
保存条件
未开封试剂盒-20℃保存,自生产之日起12个月有效。
运输条件
干冰运输。
注意事项
- 检测仪器选择:能够检测化学发光的仪器都适用本试剂盒的检测,但是针对相同的样品,不同检测器本底信号值和测量值均可能不同;且对于同一样本检测,不同仪器的数值不可横向比较。为防止孔间干扰,推荐使用不透明白色或黑色细胞培养板。
- 由于发光信号会受到检测环境如培养基组分、温度等影响,所以应确保同组内不同样本检测条件一致。
- 酶促反应对温度较为敏感,加样检测前务必将检测试剂以及细胞培养板平衡至室温。
- 如需同时检测多个细胞培养板,请尽量确保每个细胞板加入检测溶液后孵育时间一致,再进行数据读取,以此获得最佳的检测结果。
- 海肾萤光素酶检测底物(100×)配制在无水乙醇中。由于无水乙醇容易挥发,有时会在初次使用时发现体积明显小于包装规格的情况,此时用无水乙醇把体积补足至包装规格,混匀后即可使用。
- 海肾萤光素酶催化的生物发光的最强波长为480 nm。
数据展示:
(1)Renilla萤光素酶发光稳定性及线性检测
方法:分别使用20μL 293T细胞和CHO-K1细胞表达的Renilla萤光素酶,检测美仑及竞品Renilla试剂盒亮度及发光稳定性。
结论:本公司开发产品的发光强度略高于P品牌及B品牌;产品检测半衰期与对照相近。不同种类细胞表达的酶亮度与稳定性存在差异。
图1. CHO-K1细胞表达的Renilla萤光素酶亮度与发光稳定性检测
图2. CHO-K1细胞表达的Renilla萤光素酶亮度与发光稳定性检测
(2)本公司同类产品效果比较
方法:使用20μL 293T细胞表达的Renilla萤光素酶,检测美仑同系列产品亮度与发光稳定性。
结论:产品发光亮度依次为MA0525>MA0526>MA0524。产品发光稳定性依次为MA0525<MA0526<MA0524。
图3. 本公司同类产品比较