产品描述
Dulbecco的改良Eagle培养基—DMEM（Dulbecco’s Modified Eagle Medium）是一种广泛使用的基础培养基，适用于多种哺乳动物细胞培养，包括原代成纤维细胞，神经元，神经胶质细胞，HUVEC和平滑肌细胞，以及HeLa，293，Cos-7和PC-12等细胞系。DMEM是在MEM培养基的基础上研制的，与MEM培养基相比，氨基酸的含量增加了2倍，维生素增加了4倍，同时还增加了非必须氨基酸、微量铁离子以及丙酮酸钠。
DMEM培养基最初设计为葡萄糖含量1000mg/L的低糖型，后来又发展出葡萄糖含量为4500mg/L的高糖型，现已广泛应用于各种细胞的培养。DMEM高糖型普遍应用于生长快、粘附性低的细胞、杂交瘤的骨髓瘤细胞、克隆细胞、DNA转染的转化细胞、原代病毒宿主细胞、单一细胞的培养以及疫苗的生产，例如利用CHO细胞表达EPO和生产乙肝疫苗。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是一种高级细胞培养添加剂，可直接替代L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分，但其在水溶液中不稳定，易降解产生对细胞有害的氨；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分稳定，不会自发降解，其被细胞利用的机制为：细胞在培养时会向培养液中释放一种肽酶，将L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐渐水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，这种将低浓度水平的L-谷氨酰胺逐渐释放到培养液中的过程类似于流加培养策略，可以提高L-谷氨酰胺的利用率，且不会产生多余的氨，更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺，适用于所有的细胞，几乎无需适应，并且可以延长细胞的培养时间，减少传代次数，细胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的添加可能导致延滞期略微延长，其原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间，不影响后续培养。
我司可提供不同配方的DMEM系列培养基以供不同的细胞培养应用，详情请见不同DMEM的配方表。
| With含有 | Without不含 |
|---|---|
| 详细配方请参考说明书 | |
| •Highglucose葡萄糖 (4500mg/L) | • HEPES |
| • Sodium Pyruvate丙酮酸钠(110mg/L) | • L-Glutamine L-谷氨酰胺 |
| • Phenol Red 酚红(15mg/L) | |
| •L-Alanyl-L-GlutamineL-丙氨酰-L-谷氨酰胺 (4mM) | |
保存条件
2-8℃避光保存，有效期一年。常温运输。
- 质控指标及依据
- 外观及澄清度（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨB）
pH值（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅥH）
渗透压（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨG）
细菌内毒素（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨE）
微生物限度（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨJ）
细胞生长试验（中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条） - 细胞生长试验
- ￭检测依据：中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条
￭方法：- 以5×10^4/ml细胞数将细胞接种到6孔板中，每种细胞每种培养基6个孔（48h检测用3个孔+48h换液用3个孔），起始培养基为含有5%FBS的待测培养基。
- 培养箱中静置培养48h后，将每个板中3个检测孔的细胞消化收集，并使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
- 将3个换液孔中的培养基吸弃，并加入无FBS的待测培养基。
- 继续在培养箱中静置培养48h后，将换液孔中细胞消化，使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
- 稳定性实验
- ￭检测依据：行业标准及ICH指导原则
￭常规稳定性数据：推荐保质期为12个月，分别在2-8度储存条件下，检测3个月，6个月，12个月，16个月稳定性，结果无明显差异，符合质控标准
￭加速破坏实验：将产品存放于电子恒温箱内，分别测试在37摄氏度，45摄氏度，条件下的稳定性，每个温度下，分为三组，正置，倒置，水平放置，选取8小时，24小时，48小时，72小时节点进行测试，产品稳定性良好，无明显统计学差异
￭恒温运输模拟测试：将产品在7月12日从大连发往海南，普通非冷藏包装，申通快递运输，于7月19日到达，然后由对方立即申通快递返回，于7月27日收到，然后进行检测，产品稳定性良好，无统计学差异，符合恒温运输条件。
