产品描述
DMEM/F-12培养基 (Dulbecco’s Modified Eagle Medium/Nutrient Mixture F-12)是DMEM培养基和Ham’s F–12培养基的1:1混合物，是在DMEM培养基的基础上，添加F-12培养基中更为丰富的营养成分，含有多种微量元素。Dulbecco改良Eagle培养基（DMEM）是改良的Eagle基本培养基（BME），氨基酸和维生素浓度是BME的四倍。Ham’s F–12以Ham’s F-10培养基为基础，显著提高了胆碱、肌醇、腐胺和几种氨基酸的浓度。DMEM/F-12被广泛用于支持多种哺乳动物细胞的生长，包括MDCK、神经胶质细胞、成纤维细胞、人内皮细胞和大鼠的成纤维细胞等。同时，DMEM/F12常作为开发无血清培养基的基础，也适用于低血清含量下哺乳动物细胞的培养以及克隆密度培养。
L-丙氨酰-L-谷氨酰胺是一种高级细胞培养添加剂，可直接替代L-谷氨酰胺。L-谷氨酰胺是细胞培养液体环境中所必需的一种营养成分，但其在水溶液中不稳定，易降解产生对细胞有害的氨；而L-丙氨酰-L-谷氨酰胺在水溶液中十分稳定，不会自发降解，其被细胞利用的机制为：细胞在培养时会向培养液中释放一种肽酶，将L-丙氨酰-L-谷氨酰胺逐渐水解成L-丙氨酸和L-谷氨酰胺，这种将低浓度水平的L-谷氨酰胺逐渐释放到培养液中的过程类似于流加培养策略，可以提高L-谷氨酰胺的利用率，且不会产生多余的氨，更利于细胞的生长。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺可以代替等摩尔的L-谷氨酰胺，适用于所有的细胞，几乎无需适应，并且可以延长细胞的培养时间，减少传代次数，细胞活性降低得更慢。L-丙氨酰-L-谷氨酰胺的添加可能导致延滞期略微延长，其原因是肽酶的释放和二肽的消化需要一定的时间，不影响后续培养。
我司可提供不同配方的DMEM/F-12系列培养基以供不同的细胞培养应用，详情请见不同DMEM/F-12的配方表。
| With含有 | Without不含 |
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| 详细配方请参考说明书 | |
| • D-Glucose葡萄糖(3151mg/L) | |
| • L-Alanyl-L-GlutamineL-丙氨酰-L-谷氨酰胺(542mg/L) | • L-Glutamine谷氨酰胺 |
| • Sodium Pyruvate丙酮酸钠(55mg/L) | |
| • Phenol Red酚红(8.1mg/L) | |
| • HEPES(3600mg/L) | |
保存条件
2-8℃避光保存，有效期一年。常温运输。
- 质控指标及依据
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外观及澄清度（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨB）
pH值（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅥH）
渗透压（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨG）
细菌内毒素（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨE）
微生物限度（中华人民共和国药典2010版二部附录ⅨJ）
细胞生长试验（中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条） - 细胞生长试验
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￭检测依据：中华人民共和国化工行业标准《哺乳类动物细胞培养基》 HG/T3935-2007第707条
￭方法：- 以5×10^4/ml细胞数将细胞接种到6孔板中，每种细胞每种培养基6个孔（48h检测用3个孔+48h换液用3个孔），起始培养基为含有5%FBS的待测培养基。
- 培养箱中静置培养48h后，将每个板中3个检测孔的细胞消化收集，并使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
- 将3个换液孔中的培养基吸弃，并加入无FBS的待测培养基。
- 继续在培养箱中静置培养48h后，将换液孔中细胞消化，使用细胞计数仪进行计数和存活率测定。
- 稳定性实验
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￭检测依据：行业标准及ICH指导原则
￭常规稳定性数据：推荐保质期为12个月，分别在2-8度储存条件下，检测3个月，6个月，12个月，16个月稳定性，结果无明显差异，符合质控标准
￭加速破坏实验：将产品存放于电子恒温箱内，分别测试在37摄氏度，45摄氏度，条件下的稳定性，每个温度下，分为三组，正置，倒置，水平放置，选取8小时，24小时，48小时，72小时节点进行测试，产品稳定性良好，无明显统计学差异
￭恒温运输模拟测试：将产品在7月12日从大连发往海南，普通非冷藏包装，申通快递运输，于7月19日到达，然后由对方立即申通快递返回，于7月27日收到，然后进行检测，产品稳定性良好，无统计学差异，符合恒温运输条件。