产品描述:
铁是人体必需的微量元素之一,是生物体内最丰富的过渡金属元素,是血红蛋白、肌红蛋白、细胞色素及其他酶系统的主要成分。铁稳态的任何变化都可能导致铁超载疾病。近年来,活细胞中的游离铁受到广泛关注,游离铁最常以其稳定的氧化还原态存在,即亚铁离子(Fe2+)和铁离子(Fe3+)。对研究者来说,在研究细胞内的还原环境、金属转运蛋白和Fe2+的水溶性时,了解Fe2+的行为比了解Fe3+的行为更为重要。因此,准确、方便和经济地量化生物组织内亚铁离子(Fe2+),对于临床评估铁负荷、研究这些疾病的机制以及评估铁死亡诱导通路的活性具有巨大价值。
细胞二价铁离子(Fe2+)荧光法检测试剂盒(Cell Ferrous Iron (Fe2+) Fluorometric Assay Kit),包含二价铁离子检测探针和用于细胞标记的染色缓冲液。该探针可用于测量、检测或筛选Fe2+,适用于活细胞内Fe2+的检测。当探针与Fe2+反应后,可生成一种不可逆的橙红色荧光产物(激发波长:540-550 nm,发射波长:570-580 nm)。以96孔板为例,MA0647-1可检测10个孔的样品;MA0647-2可检测96个孔的样品。
产品优势:
- 提供一种可以和Fe2+特异性结合的荧光探针,该探针可用于测量、检测或筛选Fe2+,对Fe2+反应的选择特异性高;
- 可以实现对二价铁离子的快速高灵敏分析,检测速度快;
- 适用于活细胞内Fe2+的检测。当探针与Fe2+反应后,可以生成一种不可逆的橙红色荧光产物,对细胞染色后荧光强度高;
- 本试剂盒中的探针为溶液形式,且包含细胞标记所需的染色缓冲液,简化了实验前期准备工作,既快速便捷又安全可靠。
保存条件:探针溶液(2 mmol/L)-20℃避光密封保存,细胞染色缓冲液2-8℃保存,自生产之日起6个月有效。
运输条件:干冰运输。
操作方法:详见说明书。
注意事项:
- 探针溶液避免反复冻融,使用前需要充分融解混匀,变成液体状态后离心直至液体离至管底部再开盖。
- 染色工作液必须现配现用,配制好的工作液请在当天使用。
- 本试剂盒适用于活细胞检测,对死细胞无法发挥出探针的正常性能。
- 更换培养基会导致探针泄漏到细胞外,因此染色后不要更换培养基。
- 设置对照组:为了检查铁检测的实验条件,建议准备1个加入铁螯合剂Bpy (2,2′-Bipyridine) (阴性对照)或硫酸亚铁(Ⅱ) 铵(阳性对照)的样品,并观察荧光强度的变化。
- 荧光染料均存在淬灭问题,保存和使用本试剂盒的过程中请尽量注意避光,以减缓荧光淬灭。建议染色后尽量当天完成检测。
- 为了您的安全和健康,操作时请穿着实验服并佩戴一次性手套。
数据展示:
图1. 细胞二价铁离子(Fe2+)荧光法检测试剂盒对Hela细胞的染色效果
图2. 细胞二价铁离子(Fe2+)荧光法检测试剂盒对T47D细胞的染色效果
图3. 细胞二价铁离子(Fe2+)荧光法检测试剂盒与各离子反应的荧光比值F/F0–10min
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关键词:铁死亡