产品介绍
HRV 3C Protease（Human Rhinovirus 3C Protease）是人类呼吸道病毒（HRV）的3C蛋白酶。它是一种半胱氨酸蛋白酶，能够特异性地切割HRV的蛋白质，包括VP0、VP1和VP3等核心蛋白。常用于蛋白的定向剪切。HRV 3C Protease能够识别并切割特定氨基酸序列，这使得它在包括基因工程、蛋白表达、蛋白纯化等方面具有重要意义。可以利用HRV 3C Protease对蛋白进行精确的切割，从而得到目标蛋白的特定片段或裂解产物。HRV 3C Protease由于其高效性和高特异性而成为生物技术领域的重要工具，具有广泛的应用范围和显著的研究价值。
本蛋白酶可在低温下（2-8°C）特异识别短肽Leu-Glu-Val-Leu-Phe-Gln-Gly-Pro，并在Gln和Gly氨基酸残基之间进行酶切。它可以特异性的将pGEX-6P系列等载体表达出的带有酶底物识别多肽序列融合蛋白的GST标签进行分离。本品由大肠杆菌重组表达，作为47kDa蛋白质提供，具有GST标签，易于通过GST树脂去除分离。
产品指标：
| 产品名称 | 重组蛋白酶HRV 3C Protease（GST标签） |
| 英文名 | 3C protease，Prescission Protease，PSP |
| 浓度 | 2U/µL |
| 来源 | 大肠杆菌表达 |
| 分子量 | 约47kDa |
| 储存液组分 | 50mM Tris-HCl（pH8.0）, 150mM NaCl, 5mM DTT, 50%Glycerol |
| 10x缓冲组分 | 500mM Tris-HCl（pH8.0）, 1.5M NaCl, 50mM DTT |
| 酶活定义 | 在2-8℃条件下反应16小时，能够切割100µg的GST标签的融合蛋白达90%以上所需的酶量定义为一个活性单位。 |
产品优势：
- 高效切割效率：HRV 3C Protease具有高效切割效率。对于结构简单的GST融合蛋白，每单位切割量可达1-1mg。
- 纯度高：产品经过严格的纯化，纯度高于95%。在使用HRV 3C Protease切割时不会引入其他蛋白污染样品。
- 带有GST标签易于后续纯化：产品自身带有GST标签。可实现在柱酶切，将3C蛋白及切割后的GST标签留在填料中，直接流穿收集分离好的目的蛋白，极大方便后续实验。
- 即取即用：本产品在-20℃条件以液体形式存在。实验室无需解冻可直接使用，方便快捷。
保存条件：
长期保存请储存于-80℃，自生产之日起24个月有效；小量分装后可保存于-20℃，生产之日起6个月有效，避免反复冻融。
运输条件：
干冰运输。
注意事项：
1.由于蛋白质存在二级结构及复杂的三级结构，同时各蛋白所处反应缓冲液不同，酶切效率会有所不同。部分二级及三级结构复杂的蛋白需要进行预实验（摸索HRV 3C Protease浓度梯度）来确定 HRV 3C Protease的适宜添加量。
2.100mM ZnCl2、4mM AEBSF和100μM Chymostatin将抑制HRV 3C Protease 50%以上酶活性。使用时应尽量避免添加相应组分。
3.产品仅供科研使用，不得用于临床诊断或治疗。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并佩戴一次性手套操作。产品应避免接触皮肤和眼睛，如不慎接触，应立即用大量清水冲洗。
产品数据展示：
1、HRV 3C Protease纯度检测
方法：取10µg HRV 3C Protease，加入5×蛋白上样缓冲液(含DTT)，100℃加热5min。使用4~20% HEPES预制胶，150V电泳30min。
结论：如图1所示，HRV 3C Protease产品电泳条带单一，除自身47kD条带外无可见杂带，纯度高于95%。
图1. HRV 3C Protease蛋白电泳图
2、HRV 3C Protease酶切效率检测
方法：取10µg带有GST标签的质检蛋白（质检蛋白单体42kD，自身可形成多聚体），加入0.1U HRV 3C Protease，在2-8℃条件下反应16小时。加入5×蛋白上样缓冲液(含DTT)，100℃加热5min。使用4~20% HEPES预制胶，150V电泳30min。
结论：如图2所示，我公司HRV 3C Protease已将GST质检蛋白完全切割。电泳条带仅有HRV 3C Protease（47kD）、被切割后的GST（26kD）、质检蛋白（16kD），原GST质检蛋白单体（42kD）及多聚体处已无条带存在。相比之下进口T品牌有部分单体GST质检蛋白未被切割，42kD处存在条带。
图2. HRV 3C Protease切割10μg GST质检蛋白后蛋白电泳结果（2-8℃反应16h）