CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒

产品描述：

CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒基于一种新型荧光探针CFDA SE（Carboxyfluorescein diacetate, succinimidyl ester），用于检测细胞增殖和细胞荧光示踪。

该试剂盒的主要工作原理为：CFDA SE是二乙酸荧光素（FDA）的衍生物，是一种可穿透细胞膜的荧光染料，其本身不具有荧光发光性，当通过被动运输进入活细胞后，可被胞浆内的酯酶催化生成羧基荧光素琥珀酰亚胺酯（CFSE），可发出强烈的绿色荧光，共价结合的荧光分子很少从细胞内脱落。在细胞分裂增殖过程中，CFSE 标记荧光可平均分配至两个子代细胞中，荧光强度变为亲代细胞的一半，因此通过流式细胞仪检测，根据荧光强度的不同，可检测出未分裂细胞、分裂一次（1/2的荧光强度）、二次（1/4的荧光强度）、三次（1/8的荧光强度），以及更多分裂次数的细胞。CFDA SE可检测细胞分裂次数多达八次甚至更多。经CFDA SE标记的非分裂细胞的荧光非常稳定且均一，稳定标记的时间可达数月，因此非常适用于细胞群落分析。

CFDA SE标记细胞呈绿色荧光，E_x=492 nm，E_m=517 nm，用荧光显微镜和流式细胞仪进行均一染色的细胞示踪观察，可以应用到免疫学的多个领域。CFDA SE最常用于淋巴细胞的增殖检测，也可用于成纤维细胞、自然杀伤细胞、造血祖细胞等其他细胞的增殖检测等。

产品优势：

• 方便快捷：试剂盒包含配制CFDA SE储存液所需的溶剂和细胞标记用的染色缓冲液，简化了实验前期准备工作。
• 标记效果好：CFDA SE标记细胞后荧光明亮、分布均一；可以追踪细胞在体内和体外的分裂增殖过程。
• 安全稳定：对细胞生理活动没有影响；标记的荧光可以维持长达数周。
• 兼容性好：进入细胞后荧光不受内环境影响，可检测各种不同来源细胞，适用于不同培养体系。

保存方法：

-20℃保存，自生产之日起12个月有效。其中CFDA SE荧光探针需要干燥避光保存。

注意事项：

1. 所有试剂在使用前均需彻底解冻、混匀，混匀过程中尽量避免产生气泡；CFDA SE溶剂在较低温度下会凝固，请于20-25℃水浴片刻至全部融化后再使用。
2. 试剂中含有荧光染料，保存或进行标记时尽量避光操作，以避免荧光淬灭问题。
3. 不同细胞的内酯酶活性不同，因此染色效果具有差异性。可根据细胞类型及培养条件摸索最佳工作浓度。
4. 若需要对细胞进行固定，请用醛类固定剂如3.7%多聚甲醛于室温固定15 min；之后若还需要进行其他如抗体标记，请用冰丙酮透化处理细胞10 min。
5. 为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。

实验数据：

在使用CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒标记细胞完成后的第0-7天分别用流式细胞仪检测，记录不同分裂次数细胞群的荧光强度；并在荧光显微镜下观察细胞染色情况，拍照记录。

如图1所示，CFDA SE细胞增殖与示踪检测试剂盒标记细胞效果好，荧光强度高；如图2所示，荧光能够正常的随着细胞分裂而减弱，流式拟合出的增殖峰图中不同分裂次数的细胞峰可被明显区分。

图1 CFDA SE试剂盒标记细胞后0-7天荧光显微镜图

图2. CFDA SE试剂盒标记细胞后0-7天流式检测拟合峰图