产品描述
TCEP即TCEP-HCl,全称Tris(2-carboxyethyl)phosphine hydrochloride,中文名为三(2-羧乙基)膦盐酸盐。本产品为0.5M TCEP溶液,用NaOH调节pH值至6.8,常作为DTT的替代物用于蛋白上样缓冲液和其它还原试剂的配制。
图1. TCEP-HCl的化学结构式
TCEP性质稳定、无气味,反应活性温和。可选择性还原多肽或蛋白质中的二硫键,还原效率高。在酸性或者碱性溶液中还原性都很稳定,使用范围广泛,无论是普通的SDS-PAGE中蛋白质的还原,还是一些特殊实验如固相金属离子亲和层析(IMAC)都适用,也特别适用于组氨酸标记的蛋白纯化、马来酰亚胺半胱氨酸残基反应,它能够预防半胱氨酸残基形成二硫键,且不像DTT或β-巯基乙醇本身易与马来酰亚胺反应。
TCEP与DTT特点比较
产品特点 | TCEP | DTT |
气味 | 无味 | 刺鼻的气味 |
水中溶解性 | 310mg/ml | 50mg/ml |
储存稳定性 | 冷藏保存 | 冷冻保存 |
还原稳定性 | 2-3周 | 3-7天 |
工作浓度范围 | 5-50mM | 1-100mM |
Ni2+柱纯化His标签的蛋白 | 适用 | 不适用 |
马来酰亚胺标记蛋白反应 | 标记前不需要去除 | 标记前需要去除 |
保存条件
2-8℃保存,自生产之日起12个月有效。
注意事项
- TCEP对人体有害,操作时请小心,并注意有效防护以避免直接接触人体或吸入体内。
- 尽量防止金属接触TCEP溶液,否则会一定程度上降低TCEP的活性。
- 大多数蛋白质无需变性剂即可高效还原,但加入盐酸胍等变性剂有助于蛋白质内部二硫键暴露,便于TCEP还原二硫键。
- 本产品仅限于专业人员的科学研究用,不得用于临床诊断或治疗,不得用于食品或药品,不得存放于普通住宅内。
- 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。