分子式:C12H14N4O8 分子量:342.26
简介:2-NBDG 是一种荧光标记的脱氧葡萄糖类似物,可用作细胞葡萄糖代谢评估的示踪剂,用于直接监测活细胞和组织的葡萄糖摄取。它还可用作局部对比剂,用于检测肿瘤。2-NBDG 可通过实时共聚焦、高分辨率或宽视场荧光显微镜以及流式细胞术进行检测。2-NBDG 光稳定性低于罗丹明荧光探针。
别名:2-脱氧-2-[(7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑-4-基)氨基]-D-葡萄糖;2-(N-7-硝基-2,1,3-苯并恶二唑-4-氨基)-2-脱氧-D-葡萄糖
物理性状及指标:
外观:…………………淡黄至橙色粉末
溶解性:………………Water:5mg/mL
纯度:…………………>98%
Ex/Em:……………488/542 nm
储存条件:-20℃,避光防潮密闭干燥
运输条件:湿冰运输(按季节)
产品用途:科研试剂,广泛应用于分子生物学、药理学等科研方面,严禁用于人体。
1.2-NBDG可以在许多种体外细胞中使用,例如HepG2人类肝癌细胞、L6大鼠骨骼肌细胞、MCF-7乳腺癌上皮细胞和星形胶质细胞,它还用于疾病模型,如癫痫大鼠、高血糖、糖尿病或小鼠异种移植的癌症模型。
2.2-NBDG通过与葡萄糖相同的葡萄糖转运体(GLUT)进入细胞,它会被己糖激酶在C-6位置磷酸化成为2-NBDG-6-phosphate,并能够很好地保留在细胞内。荧光强度与细胞内葡萄糖摄取活性成正比。可以使用流式细胞术检测2-NBDG进入活细胞的情况,也可以使用荧光微孔板分析法测量转运的2-NBDG在细胞内的浓度。它还可以简单地用荧光成像显微镜进行检测。
3.与其他葡萄糖示踪剂如2-DG或FDG相比,2-NBDG可以以高时间和空间分辨率在单个细胞水平上进行原位测量。
使用方法:(来自公开文献,仅供参考)
- 2-NBDG 工作液准备
(1)制备储存液:用 2.92 mL ddH2O 稀释 1 mg 2-NBDG 配制 1 mM 储存液。
(2)工作液的配制:用预热好的无血清细胞培养基或 PBS 稀释储存液,配制成 10-200 μM 的 2-NBDG 工作液。
【注】请根据实际情况调整 2-NBDG 工作液浓度,且现用现配。
- 细胞染色
(1)悬浮细胞:离心收集细胞,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
贴壁细胞:弃去培养基,加入胰蛋白酶消化细胞。离心弃去上清后,加入 PBS 洗涤两次,每次 5 分钟。
(2)加入 1 mL 2-NBDG 工作液,室温孵育 5-60 分钟。
(3)400 g,4℃ 离心 3-4 分钟,弃去上清。
(4)加入 PBS 洗涤细胞两次,每次 5 分钟。
(5)用 1 mL 无血清培养基或 PBS 重悬细胞后,使用荧光显微镜进行观察绿色荧光,或者使用流式细胞仪或荧光酶标仪进行荧光强度的检测。(Ex/Em:488/542 nm)
【注意】
- 我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理(如0.22μm滤膜过滤),除去热原细菌,否则会导致染菌。
- 部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
参考文献:
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[3]. Tsytsarev V, Maslov K I, Yao J, et al. In vivo imaging of epileptic activity using 2-NBDG, a fluorescent deoxyglucose analog[J]. Journal of neuroscience methods, 2012, 203(1): 136-140.
[4]. Yan Chen, Junjian Zhang, Xiang-yang Zhang, 2-NBDG as a Marker for Detecting Glucose Uptake in Reactive Astrocytes Exposed to Oxygen-Glucose Deprivation In Vitro. J Mol Neurosci (2015) 55:126–130.