Name: GW4869
SKU: MB0764-1
Availability: InStock

产品简介：

GW4869 是非竞争性的中性鞘磷脂酶抑制剂，IC50值为1 μM。

别名：GW-4869；GW69A; N,N′-Bis[4-(4,5-dihydro-1H-imidazol-2-yl)phenyl]-3,3′-p-phenylene-bis-acrylamide dihydrochloride
分子式：C₃₀H₂₈N₆O₂ · ₂HCl 分子量：577.50
物理性状及指标：
外观：…………………淡黄色粉末
溶解性：………………DMSO: 0.044 mg/mL (Need ultrasonic and warming)；Water Insoluble ；Ethanol Insoluble
纯度：…………………≥98%

储存条件：

-20℃，避光防潮密闭干燥

生物活性及研究进展: 脓毒症是一种由感染引起的严重炎症性疾病，可导致多器官衰竭。在受影响的器官中，心肌抑郁被认为是脓毒性死亡的主要原因。虽然已经发现大量的循环促炎细胞因子是导致脓毒症的心脏功能障碍的罪魁祸首，但潜在的机制仍然不清楚。此外，最近的研究表明，细菌感染的巨噬细胞释放的外泌体是促炎的。研究中检验了阻断外泌体的产生是否可以保护脓毒症引起的炎症反应和心脏功能障碍。用GW4869对RAW264.7巨噬细胞进行预处理，该巨噬细胞是一种外泌体生物发生/释放抑制剂，随后是内毒素(LPS)挑战。在体内，在内毒素治疗或cecal结扎/穿刺(CLP)手术之前，注射了GW4869的野生型(WT)小鼠。观察到预处理GW4869明显受损释放液和促炎细胞因子(TNF-αIL-1β,il – 6)在RAW264.7巨噬细胞。在LPS治疗或CLP手术后12小时，WT小鼠接受GW4869预处理后血清中外泌体和促炎细胞因子的含量低于对照组。因此，GW4869治疗减少了脓毒症引起的心脏炎症，减轻了心肌抑郁，延长了存活时间。总之，我们的研究结果表明，在脓毒症中对外生的阻断抑制了脓毒症引起的炎症反应，从而改善了心脏功能和生存。

产品描述	GW4869是中性Smase(鞘磷脂酶)的非竞争性抑制剂，IC50为1 μM。它对N-SMase具有选择性，在浓度高达150 μM时对酸性SMase没有抑制作用。
靶点	SMase (Cell-free assay) 1 μM
体外研究	GW4869在体外细胞模型中抑制N-SMase。GW4869并不显著地破坏TNF诱导的NF-κB易位入核，因此，GW4869不干涉TNF介导的其他关键信号作用。通过检测核浓染、caspase激活、PARP的降解以及台盼蓝吸收发现，GW4869能以浓度依赖方式保护细胞免于死亡，同时显著抑制细胞色素C从线粒体中的释放以及caspase9的激活，因此N-SMase的激活应位于线粒体线粒体功能障碍的上游。在浓度高达150 μM时，GW4869对克隆的人源A-SMase没有抑制作用，对其他水解酶如细菌磷脂酰胆碱-PLC和牛源PP2A没有或仅具有微弱抑制活性，而相对于人源lyso-PAF PLC，对大鼠大脑中此酶的活性更为显著。
体内研究	全身用药（GW4869）并不改变肝脏、心脏或骨骼肌中神经酰胺或鞘磷脂的含量，但减少了脑中神经酰胺的含量、增加了鞘磷脂含量。通过GW4869抑制nSMase2可延缓学习，在给小鼠使用GW4869后，没有减少其在反复训练后找到隐蔽平台的延迟，说明它们对应用空间线索进行导航的学习障碍。对小鼠腹腔注射以GW4869会减少其脑部和血清中外来体、脑部神经酰胺以及Aβ1-42斑块负荷的水平。GW4869在体内通过阻止外来体分泌减少淀粉样斑块形成，在达到抑制nSMase2引起的生理效应的浓度（即有效浓度）下，GW4869具有较少毒性。

用途及描述：

科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。GW4869 是中性Smase(鞘磷脂酶)的非竞争性抑制剂。体内研究表明GW4869治疗减少了脓毒症引起的心脏炎症，减轻了心肌抑郁，延长了存活时间。

储液配置
	1 mg	5 mg	10 mg
1 mM	3.1611 mL	15.8053 mL	31.6106 mL
5 mM	0.6322 mL	3.1611 mL	6.3221 mL
10 mM	0.3161 mL	1.5805 mL	3.1611 mL

经典实验操作（仅供参考）
细胞实验	Cell lines:MCF7细胞 Concentrations:10-20 μM Incubation Time:30 min Method: 将MCF7细胞培养在含10%FBS的RPMI 1640培养基中，置于37℃、5%CO₂的培养箱中。将细胞以1.7 × 10⁶个/10cm培养皿的密度接种，每皿具有10 ml完全培养基。24小时后，将培养基更换为7 ml 含2%FBS和25 mM Hepes（pH 7.5）的RPMI 1640培养基，在处理前，让细胞静置2小时。将GW6849用Me2SO配制成1.5 mM悬浮储存液，储存于-80℃。在使用前，加入5% MSA到50 μL GW4869储存悬浮液中进行溶解，此时，GW4869的浓度为1.43 mM。将悬浮液充分混合，并置于37℃加热，直至澄清。然后将抑制剂加入到细胞培养基中，处理30分钟。然后处理以TNF。对照组处理以含5% MSA的Me2SO，浓度与GW4869处理浓度一一对应。
动物实验	Animal Models:完全缺失nSMase2活性的小鼠（遗传背景：C57BL/6J小鼠） Formulation:2.5% DMSO Dosages:1.25 mg/kg Administration:i.p.