Fenofibrate

Fenofibrate 是一种Fibrate类化合物，是纤维酸衍生物。

靶点

非诺贝特是一种相对有效的CYP2B6抑制剂（IC50 = 0.7±0.2μM）和CYP2C19（IC50 = 0.2±0.1μM）。 非诺贝特也是CYP2C8（IC50 = 4.8±1.7μM）和CYP2C9（IC50 =9.7μM）的中度抑制剂。 非诺贝特以高于PPARα的亲和力结合并抑制细胞色素P450环加氧酶（CYP）2C。 非诺贝特是一种众所周知的PPARα激动剂，但对209种常用处方药和相关异生素的体外评估表明，非诺贝特也是细胞色素P450环氧化酶（CYP）2C的有效抑制剂。 非诺贝特对CYP2C的亲和力比对PPARα（EC50 =30μM）高> 10倍（EC50 = 2.39±0.4μM）。 低剂量的非诺贝特抑制CYP2C8活性而不激活PPARα。

在这种低剂量（10μg/ g /天）下每日摄入非诺贝特可抑制由CYP2C8过表达诱导的视网膜和脉络膜新血管形成，分别为29％（P = 0.021）和36％（P = 1.2×10-9）。

MB1349-S

Fenofibrate（标准品）

MB21009

二氢非诺贝特-d6

1 mg

5 mg

10 mg

• 非诺贝特，他汀类药物（阿托伐他汀，洛伐他汀，普伐他汀，辛伐他汀和辛伐他汀，辛伐他汀的活性形式）和格列吡嗪对重组人CYP1A2，CYP2B6，CYP2C8，CYP2C9，CYP2C19，CYP2D6和CYP3A4的半数抑制浓度（IC50s）使用荧光CYP450抑制测定法测定。简而言之，将药物溶解在甲醇或乙腈中。在96孔测定板中，将药物在含有辅因子的溶液中稀释至一系列浓度，所述辅因子包括NADP +（终浓度1.3mM），MgCl 2（终浓度3.3m M），葡萄糖-6-磷酸（G6P，终浓度3.3mM）。 ）和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶（终浓度0.4U / mL）。将混合物在37℃下预温育10分钟。将酶和荧光底物在磷酸钠反应缓冲液（pH 7.4，终浓度200mM）中稀释至所需浓度并混合。通过将酶和底物混合物添加到辅因子和药物混合物中来开始反应。所有测定的最终反应体积为200μL。在37℃下孵育预定的一段时间（15至45分钟）后，加入75μL猝灭溶液（0.5M Tris碱或2N NaOH）终止反应。使用BioTek Synergy 2荧光读数器测定荧光。每种药物以八种浓度一式两份进行测试。为了估计IC 50，使用针对背景校正的净荧光计算抑制百分比。然后将抑制百分比的值拟合到三或四参数对数 – 逻辑模型。

动物实验

• 对于较高剂量（100mg / kg /天），将非诺贝特溶解在玉米油（小鼠）中。
• 对于较低剂量的治疗（10mg / kg /天），将非诺贝特溶解在10％DMSO中以制备10mg / mL溶液（小鼠）。
• 小鼠
• 使用小鼠氧诱导的视网膜病（OIR）模型。简言之，为诱导视网膜新生血管形成，小鼠幼仔及其哺乳母亲暴露于P7至P12的75±3％氧气。用于较高剂量的非诺贝特（F6020）治疗（100mg / kg /天）。将非诺贝特溶解在玉米油中以制备100mg / mL溶液，并使用纯玉米油作为媒介物对照。对于较低剂量的治疗（10mg / kg /天），将非诺贝特溶解在10％DMSO，D2650中以制备10mg / mL溶液，并使用10％DMSO作为媒介物对照。回到室内空气后，每天从P12到P16口服强尼非贝特（100或10mg / kg）或媒介物对照小鼠。在P17，在安乐死后立即摘出眼，并在室温下在PBS中的4％多聚甲醛中固定1小时。然后解剖视网膜并在室温下用Alexa Fluor 594缀合的同工凝集素GS-IB4（10μg/ mL）染色过夜。用PBS洗涤后，将视网膜安装到显微镜载玻片上，感光体侧朝下并嵌入SlowFade抗褪色封固剂中。使用具有图像软件的荧光显微镜拍摄视网膜图像。分析视网膜新血管形成。