DAPI(meilunbio)； 4，’6-二脒基-2-苯基吲哚二盐酸盐；DAPI dihydrochloride
分子式：C16H15N5·2HCl分子量：350.25
简介： DAPI，即2-(4-Amidinophenyl)-6-indolecarbamidine dihydrochloride，也称DAPI dihydrochloride。
DAPI的中文名称是4，6-联脒-2-苯基吲哚，是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料。其作用机理与溴化乙啶（EB）等染色剂的机理类似：它们与DNA双螺旋的凹槽部分可以发生相互作用，从而与DNA的双链紧密结合。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。和EB(ethidium bromide)相比，对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。结合后产生的荧光基团的吸收峰是358nm而散射峰是461nm，正好UV（紫外光）的激发波长是356nm，使得DAPI成为了一种常用的荧光检测信号。DAPI染色常用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。用于细胞核染色时，推荐的DAPI工作浓度为0.5-10μg/ml。
别名：DAPI dihydrochloride
物理性状及指标：
外观：……………………黄色结晶性粉末
溶解性：…………………溶于水(＞1mg/ml)
纯度：……………………>95%
Ex (nm) ：………………DAPI 340 ；DAPI-DNA 358
Em (nm) ：………………DAPI 488 ；DAPI-DNA 461
用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学、药理学等科研方面，严禁用于人体 。DAPI适用于所有常见细胞和组织细胞核染色，可以直接用于固定细胞或组织的细胞核染色。DAPI也用于细胞凋亡检测，染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测。DAPI也常用于普通的细胞核染色以及某些特定情况下的双链DNA染色。和双链DNA结合后可以产生比DAPI自身强20多倍的荧光。与EB(ethidium bromide)相比，DAPI对双链DNA的染色灵敏度要高很多倍。
使用方法推荐：(仅供参考)
1.配制母液：用双蒸水溶解，终浓度为1mg/ml。本产品不可以用缓冲液直接溶解。-20℃可保存1年，建议分装保存，避免反复冻融。
2.配制工作液：用双蒸水或PBS稀释母液，配制成所需要的工作的浓度（0.5-10μg/ml）。
2.固定的细胞或组织染色：
对于固定的细胞或组织样品，固定后，适当洗涤去除固定剂。DAPI染色通常在其他染色的最后进行。如果不需要进行其它染色，则直接进行DAPI 染色。
a)对于贴壁细胞或组织切片：加入适量DAPI染色液，覆盖住样品即可。
对于悬浮细胞：至少加入待测染色样品体积3倍的染色液，混匀。室温放置3-5分钟。
b)吸除DAPI染色液，用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次，每次3-5分钟。
c)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长358nm，发射波长461nm。
3. 活细胞或组织染色：
a)细胞培养物中加入适量DAPI染色液，约1/10细胞培养基体积，必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液，对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b)在 37℃培养细胞 10～20 分钟。
c)用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d)直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长358nm，发射波长461nm。
注意事项：
- 荧光染料都存在淬灭的问题，建议染色后尽量当天完成检测。
- 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。（美仑货号MA0221/MA0222/MA0235/MA0236）
- DAPI对人体有一定刺激性，请注意适当防护。为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
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【注意】
- 我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
- 部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。