Quisinostat (JNJ-26481585) 2HCl

Quisinostat (JNJ-26481585) 2HCl是一种新型的，第二代HDAC抑制剂，对HDAC1最有效，无细胞试验中IC50为0.11 nM，作用于HDACs 2，4，10，和11适度有效；比作用于HDACs 3，5，8，和9选择性强30倍，对HDACs 6和7作用效果最弱。

特性

JNJ-26481585是口服生物有效性的，二代氧肟酸基的HDAC抑制剂。

靶点

体外研究

体外, JNJ-26481585有效抑制一组重组HDAC酶，最有效抑制HDAC1，IC50为 0.11 nM，另外抑制其他家族成员如HDAC2, 4, 10和 11时效果稍微低点，IC50分别为0.33 nM, 0.64 nM, 0.46 nM 和0.37 nM。JNJ-26481585 作用于实体瘤和血癌细胞系，如肺癌，乳腺癌，结肠癌，前列腺癌，脑癌，和卵巢癌细胞系，IC50 为3.1 到 246 nM，具有广谱抗增殖活性，作用于多种人类癌细胞系时，JNJ-26481585效果比 Vorinostat, R306465, Panobinostat, CRA-24781, 和 Mocetinostat 好。最新研究显示JNJ-26481585 在低纳摩尔浓度时通过耗尽Mcl-1及诱导Hsp72产生而促进骨髓癌细胞死亡。

体内研究

JNJ-26481585按最大耐受剂量(10 mg/kg腹腔注射及40 mg/kg口服处理)作用于对HDAC1敏感的A2780卵巢癌模型3天，导致产生HDAC1-调节的荧光, 可测的抑制肿瘤生长效果。而且, 与5-fluorouracil/Leucovorin相比，JNJ-26481585更有效抑制C170HM2大肠癌肝转移。

MB2216

Rocilinostat (ACY-1215)

MB4754

Scriptaid

MB7001

Belinostat

MB3885

CUDC-907

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.1395 mL

10.6977 mL

21.3954 mL

5 mM

0.4279 mL

2.1395 mL

4.2791 mL

10 mM

0.2140 mL

1.0698 mL

2.1395 mL

50 mM

0.0428 mL

0.2140 mL

0.4279 mL

HDAC 活性实验 :
使用杆状病毒感染的Sf9细胞表达全长HDAC蛋白。此外, HDAC3共表达作为与人类NCOR2作用的复合体。为了测定含HDAC1细胞复合体活性, 免疫沉淀反应的HDAC1复合体和组蛋白H4肽段[生物素-(6-氨基)Gly-Ala-(乙酰基[3H])Lys-Arg-His-Arg-Lys-Val-NH2]的[3H]乙酰基标记的片段在50μL酶实验buffer(25mM HEPES (pH 7.4),1 M 蔗糖, 0.1 mg/mL BSA 和0.01% (v/v) Triton X-100)中温育。在37oC下温育45分钟，或者在室温下温育30分钟。加入底物之前，加入浓度不断增加的HDAC抑制剂，然后在室温下预温育10分钟。温育后，加入35μL 终止 buffer (1 M HCl 和0.4 M 乙酸)终止反应。用800μL乙酸乙酯提取释放 [3H]乙酸，然后通过闪烁计数器量化。通过Western blot 分析，测定等量的进行免疫沉淀反应的HDAC1。

细胞实验：

• Cell lines:NCL-H2106, Colo699和 LNCAP
• Concentrations:0到300 nM
• Incubation Time:24 小时
• Method:使用MTT测定HDAC抑制剂抑制细胞增殖的效果。使用Alamar Blue法测定非小细胞肺癌(NSCLC)细胞系的增殖。为了测定 血癌细胞系的增殖，细胞温育72小时，通过 MTS实验测评毒性。进行三次平行实验，测定 IC50。
  (Only for Reference)

动物实验：

• Animal Models:在腹股沟区皮下注射HCT116人类结肠癌细胞的雄性NMRI nu/nu无胸腺鼠, 腹腔注射溶于1 mL 0.9% NaCl(pH 7.3)的C170HM2细胞悬浮液的雄性MFI裸鼠
• Formulation:JNJ-26481585在2 mg/mL 20%羟丙基-β-环糊精(终 pH 为8.7)中配制
• Dosages:≤10 mg/kg
• Administration:口服处理或腹腔注射