I-BET-762

I-BET-762是一种BET(bromodomain and extra terminal domain)蛋白抑制剂，IC50约为35 nM，抑制巨噬细胞产生促炎蛋白，抑制急性炎症，对其他溴区结合域包含的蛋白具有高度的选择性。

靶点

BET proteins

IC50

35 nM

体外研究

I-BET-762抑制BET(溴区和额外的末端结构域) 蛋白, BRD2, BRD3 和 BRD4, 结合到BET的串联溴区，Kd为50.5-61.3 nM, 在FRET分析中，置换BET串联溴区的一种四乙酰化的H4肽，IC50为32.5-42.5 nM。I-BET-762占据BET蛋白的乙酰基-赖氨酸结合口袋，并抑制BET蛋白结合到乙酰化的组蛋白，从而破坏了炎性基因表达必不可少的染色质复合物的形成。分化过程中的第2天使用I-BET-762处理，改变CD4+T细胞的细胞因子产生，上调一些抗炎基因产物的表达，并下调一些促炎细胞因子的表达。

体内研究

I-BET-762保护防止脂多糖诱导的内毒素休克和细菌诱导的脓毒病。LPS注射后1.5小时，单剂量I-BET处理，可治愈小鼠。I-BET每日两次注射，持续2天，保护小鼠免于脓毒症引起的死亡。早期I-BET-762处理实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠模型，抑制Th1分化的2D2 T细胞诱发神经性炎症的能力。

I-BET151 (GSK1210151A)

MB3692

PFI-1 (PF-6405761)

MB4419

PLX51107

MB4243

RVX-208(RVX 000222)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3590 mL

11.7952 mL

23.5905 mL

5 mM

0.4718 mL

2.3590 mL

4.7181 mL

10 mM

0.2359 mL

1.1795 mL

2.3590 mL

50 mM

0.0472 mL

0.2359 mL

0.4718 mL

荧光共振能量转移（FRET）滴定:
在有四乙酰化的组蛋白H4肽（200 nM）存在时，在50 mM HEPES pH7.5, 50 mM NaCl, 0.5 mM CHAPS中进行对BRD2 (200 nM), BRD3 (100 nM) 和 BRD4 (50 nM)的I-BET滴定。平衡1小时后，在含0.05% (v/v) BSA 和 400 mM KF的实验缓冲液中加入2nM 铕穴状化合物标记的链霉亲和素和10 nM XL-665标记的anti-6His 抗体，使用FRET检测溴区蛋白：肽相互作用。使用Envision酶标仪（激发菠菜320 nm，发射波长615 nm和665 nm）对实验板进行读数。

细胞实验：

• Cell lines:CD4+T 细胞
• Concentrations:~500 nM
• Incubation Time:60-72 小时
• Method:从10到12周的小鼠淋巴结和脾中分离CD4+T细胞，在指定细胞因子存在时，使用与板结合的anti-CD3和anti-CD28抗体活化。在最初激活的60-72小时，包含I-BET-762化合物。在T细胞培养和扩张的5天过程中，化合物稀释到初始浓度的12倍。

动物实验：

• Animal Models:小鼠
• Formulation:20% β-环糊精, 2% DMSO，溶于0.9%生理盐水
• Dosages:30 mg/kg
• Administration:静脉注射