BIBR 1532

BIBR 1532是一种有效的，选择性的，非竞争性telomerase抑制剂，无细胞试验中IC50为100 nM。在远高于此IC50的浓度范围下，BIBR 1532对DNA和RNA聚合酶，包括HIV逆转录酶没有抑制作用。

靶点

体外研究

在体外, BIBR 1532非竞争性抑制端粒酶活性，这种作用具有剂量依赖性，IC50为100 nM。BIBR 1532作用于JVM13白血病细胞系,具有抗增殖效果，这种作用具有剂量依赖性，IC50为52 μM, 且作用于其他白血病细胞系，包括 Nalm-1, HL-60, 和 Jurkat具有相似结果。此外, BIBR 1532作用于急性髓细胞性白血病(AML)，具有 抗增殖效果，IC50为56 μM，而不会影响正常造血干细胞的增殖能力。BIBR 1532 (2.5 μM) 作用于MCF-7/WT 和抗Melphalan的MCF-7/MlnR细胞系，通过抑制端粒酶活性，而降低形成集落的能力，且缩短端粒长度，且诱导对化疗增敏。BIBR 1532 作用于T细胞幼淋巴细胞白血病(T-PLL),具有选择性细胞毒性，这种作用具有剂量依赖性，BIBR 1532处理的细胞也显示出核浓缩，及形成凋亡小体。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.0179 mL

15.0893 mL

30.1787 mL

5 mM

0.6036 mL

3.0179 mL

6.0357 mL

10 mM

0.3018 mL

1.5089 mL

3.0179 mL

50 mM

0.0604 mL

0.3018 mL

0.6036 mL

传统端粒酶检测法:
内源性端粒酶检测法中, 10 μL 端粒酶富集的抽提物与不同浓度BIBR1532混合，终体积为20 μL。在冰上预处理15分钟，然后加入20 μL反应混合物，然后转移试管到到37oC下开始反应。反应混合物为终浓度为25 mM Tris-Cl (pH 8.3), 1 mM MgCl2, 1 mM EGTA, 1 mM dATP, 1 mM dTTP, 6.3 μM 冷 dGTP, 15 μCi [α-32P]dGTP (3000 Ci/mmol; NEN), 1.25 mM精脒, 10 单位 RNA酶, 5 mM 2-巯基乙醇 及 2.5 μM TS-引物(5

细胞实验：

• Cell lines:JVM13
• Concentrations:0 到 80 μM
• Incubation Time:24 -72 小时
• Method:

细胞按一式三份接种在完全RPMI 1640培养基中，培养基中含不同浓度 BIBR1532。24 到72 小时后,加入水溶性四唑(WST-1), 通过线粒体还原酶系统转变为甲臜。存活细胞数增多，线粒体脱氢酶活性增高，导致形成的甲臜染料增多，通过酶标仪在温育2, 3, 和4小时后测量。