NVP-ADW742

NVP-ADW742是IGF-1R抑制剂，IC50为0.17 μM,作用于IGF-1R比作用于InsR效果高16倍以上;对HER2, PDGFR, VEGFR-2, Bcr-Abl和c-Kit几乎没有抑制活性。

靶点

IGF-1R

IC50

0.17 μM

体外研究

NVP-ADW742作用于IGF-1R比作用于胰岛素受体(InsR)选择性高6倍多，IC50为2.8 μM,作用于c-Kit, HER1, PDGFR, VEGFR-2,或Bcr-Abl p210时抑制活性最低，IC50>5-10 μM,与显著抑制IGF-1诱导的IGF-1R及其下游靶点Akt的磷酸化相一致。NVP-ADW742显著抑制血清刺激的多种细胞增殖，这种作用存在剂量依赖性，作用于多发性骨髓瘤(MM)细胞系时，IC50为0.1-0.5 μM，与BMSCs共培养不能克服对MM的抗癌效果。在有血清存在时，NVP-ADW742也废除肿瘤细胞对IL-6的反应。此外, NVP-ADW742有效作用于抗常规抗癌试剂(毒性化疗剂，Dexamethasone)或研究用的抗癌试剂(Thalidomide, CC-5013, TRAIL/Apo2L, PS-341)的MM细胞系，也有效作用于抗多种药物的MM患者体内的原发性肿瘤细胞。NVP-ADW742作用于肿瘤细胞和骨髓基质干细胞,降低VEGF产量，且作用于多种肿瘤类型，如甲状腺癌细胞和MM细胞，抑制IGF-1诱导的VEGF分泌。0.75 μM NVP-ADW742抑制IGF-1R，也使MM细胞或前列腺癌细胞对其他抗癌试剂如Doxorubicin, Melphalan, Dexamethasone, TRAIL/Apo2L,或PS-341敏感。

体内研究

NVP-ADW742按10 mg/kg剂量处理含扩散MM的小鼠模型，每天两次，显著抑制肿瘤生长，延长寿命，且增强抗癌效果。

NVP-AEW541

MB3955

OSI-906 (Linsitinib)

MB3909

PQ401

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2047 mL

11.0234 mL

22.0468 mL

5 mM

0.4409 mL

2.2047 mL

4.4094 mL

10 mM

0.2205 mL

1.1023 mL

2.2047 mL

50 mM

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细胞激酶活性实验:
在浓度不断增高的NVP-ADW742存在时，通过96孔“Capture ELISAs”检测实验测定细胞水平 NVP-ADW742作用于IGF-1R自磷酸化的IC50值。NWT-21细胞接种在96孔组织培养板上，孔中含完全培养基，细胞生长到有70-80% 细胞汇合，然后在 0.5% FCS培养基中饥饿处理24小时。随后,在NVP-ADW742存在时，细胞温育90分钟，随后使用IGF-I (10 ng/mL) 在37oC下刺激10分钟。然后再使用冰冻的PBS冲洗细胞2次，然后在4oC 下与每孔50 μLl RIPA-buffer (50 mM Tris-HCl, pH 7.2, 120 mM NaCl, 1 mM EDTA, 6 mM EGTA, 1% NP-40, 20 mM NaF, 1 mM Benzamidine, 15 mM 焦磷酸钠, 1 mM PMSF 和 0.5 mM Na3VO4)溶解。每组实验中的裂解液转移到使用IGF-1R特定抗体预包被的黑色ELISA 板上。然后裂解液与 40 μL碱性磷酸酶(AP)标记的抗磷酸抗体混合，再在RIPA buffer中稀释到0.2 μg/mL, 然后在4oC下温育过夜。冲洗(PBST)后，在室温下与含Emerald II(每孔90 μL)的荧光AP-底物 CDPStar RTU 温育, 使用Packard Top Count闪烁计数器测量荧光值。

细胞实验：

• Cell lines:MM-1S, MM-1R, RPMI-8226/S, OPM-1, OCI-My5, SKMM2, KMS-12-BM, XG-1, L363, S6B45, 等等
• Concentrations:溶于DMSO, 终浓度为~10 μM
• Incubation Time:48小时
• Method:在有或无血清存在时，使用不同浓度NVP-ADW742处理细胞48小时。通过MTT实验测定细胞存活情况。

动物实验：

• Animal Models:静脉注射MM-1S-Luc+人MM细胞的雄性SCID/NOD小鼠
• Formulation:在25 mM 酒石酸中配制
• Dosages:10 mg/kg，每天两次
• Administration:腹腔注射或口服饲喂