Amuvatinib(MP-470)

Amuvatinib (MP-470)是一种有效的，作用于c-Kit，PDGFα和Flt3的多靶点抑制剂，IC50分别为10 nM， 40 nM和81 nM。Phase 2。

靶点

体外研究

MP-470作用于MiaPaCa-2, PANC-1, 和GIST882细胞，具有毒性，IC50为1.6 μM 到 3.0 μM。MP-470也结合且抑制一些 c-Kit 突变型, 包括 c-KitK642E, c-KitD816V,和c-KitK642E/D816V。MP-470的盐酸盐也抑制一些 c-Kit突变型,包括 c-KitD816V, c-KitD816H, c-KitV560G, 和 c-KitV654A,及Flt3 突变型(Flt3D835Y) 和两种PDGFRα 突变型 (PDGFRαV561D和 PDGFRαD842V), IC50 为10 nM 到 8.4 μM。MP-470盐酸盐有效抑制OVCAR-3, A549, NCI-H647, DMS-153, 和 DMS-114细胞增殖, IC50 为 0.9 μM–7.86 μM。MP-470 (1 μM) 作用于MDA-MB-231细胞，抑制AXL的酪氨酸磷酸化。MP-470 作用于LNCaP和PC-3,而不是DU145 细胞，具有毒性， IC50 分别为 4 μM 和 8 μM, 且在10 μM处有点增殖。MP-470 (10 μM) 作用于LNCaP细胞，使细胞周期在G1期停滞，且降低 Akt 和 ERK1/2磷酸化。MP-470 (10 μM)作用于SF767细胞，抑制c-Met磷酸化，且使细胞对 辐射敏感。MP-470 (10 μM)和辐射联合处理，抑制 GSK-3β 活性, 诱导凋亡，且可能通过抑制Rad51而破坏dsDNA b断裂修复。

体内研究

MP-470(10 mg/kg-75 mg/kg通过腹腔注射或 50 mg/kg-200 mg/kg 通过口服处理) 处理携带HT-29, A549,和SB-CL2细胞的小鼠移植瘤模型，抑制肿瘤生长。MP-470（20 mg/kg）和Erlotinib 联用处理携带LNCaP移植瘤的小鼠，显著抑制肿瘤生长。

CP-673451

MB5074

利尼伐尼；ABT869

MB3995

Telatinib

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2346 mL

11.1729 mL

22.3459 mL

5 mM

0.4469 mL

2.2346 mL

4.4692 mL

10 mM

0.2235 mL

1.1173 mL

2.2346 mL

50 mM

0.0447 mL

0.2235 mL

0.4469 mL

c-Kit 和 PDGFRα激酶抑制实验:
为了测定对c-Kit 和 PDGFRα的抑制活性,酶与不同浓度 MP-470 温育，然后使用γ-32P-ATP进行放射性标记。30分钟后, 反应混合物在丙烯酰胺凝胶上进行电泳和自磷酸化，测量渗透进酶的放射量。

细胞实验

• Cell lines:MiaPaCa-2, PANC-1, 和GIST882 细胞
• Concentrations:0-30 μM, 溶于DMSO
• Incubation Time:96 小时
• Method:细胞按每孔 2 × 103到 1 × 104个细胞接种在含 100 μL 培养基的96孔 Falcon 板上。第 1天,加入 10 μL 连续稀释的 MP-470，一式四份。温育4天后，细胞与10%三氯乙酸溶液混合。随后,使用溶于1%乙酸的0.04% Sulforhodamine B (SRB) 进行标记。多次冲洗，除去多余染料，每孔加入100 μL 50 mM Tris 溶液，溶解染料。然后在酶标仪上在 570 nm处测定每孔的吸光值。通过吸光值，计算与对照组相比的存活百分数。

动物实验

• Animal Models:携带 HT-29, A549,和SB-CL2细胞的 小鼠（无胸腺裸鼠）移植瘤模型
• Formulation:溶于玉米油，用于口服; 溶于TV-10 (60% 丙二醇, 30% PEG300, 10% 水,和150 mg/mL 2-羟丙基-β-环糊精)或 TV-10 (5% 乙醇, 40% 甘油, 55% 水, 和 300 mg/mL 环糊精)用于腹腔注射
• Dosages:10 mg/kg-75 mg/kg (腹腔注射)或50 mg/kg-200 mg/kg (口服处理)
• Administration:口服饲喂或腹腔注射