Vatalanib (PTK787 ) 2HCl

Vatalanib (PTK787) 2HCl是一种VEGFR2/KDR抑制剂，无细胞试验中IC50为37 nM，对VEGFR1/Flt-1作用稍弱，是VEGFR3/Flt-4抑制作用的18倍。

靶点

VEGFR2/KDR
(Cell-free assay)

VEGFR1/FLT1
(Cell-free assay)

VEGFR2/Flk1
(Cell-free assay)

PDGFRβ
(Cell-free assay)

VEGFR3/FLT4
(Cell-free assay)

IC50

37 nM

77 nM

270 nM

580 nM

660 nM

体外研究

Vatalanib 有效抑制VEGFR 酪氨酸激酶，作用于VEGF受体/KDR,VEGF受体/Flt-1, VEGF受体/Flk, c-Kit和PDGFR-β时, IC50 分别为0.037 μM, 0.077 μM, 0.27 μM, 0.73 μM 和 0.58 μM。Vatalanib 抑制VEGF诱导的磷酸化，作用于 HUVECs和 CHO细胞时, IC50分别为17 nM 和34 nM。而且, Vatalanib作用于HUVECs，具有通过抑制VEGF诱导的胸甘摄入而抗增殖效果，IC50为7.1 nM, 且相同剂量范围时抑制VEGF诱导的内皮细胞存活和迁移，这种作用存在剂量依赖性，且没有毒性，或者作用于不表达VEGF受体的细胞没有抗增殖效果。最新研究显示 Vatalanib明显抑制肝癌细胞生长，且通过提高Bax蛋白水平和降低Bcl-xL 和Bcl-2蛋白水平而增强IFN/5-FU 诱导的凋亡。

体内研究

在体内, Vatalanib按25-100 mg/kg剂量口服给药生长因子移植模型和肿瘤细胞驱动血管生成模型，每天一次，抑制对 VEGF和PDGF血管生成反应。Vatalanib 按相同剂量处理裸鼠，也抑制一些人类癌细胞生长和移位，且对循环血细胞和骨髓白细胞没有影响。

特征

Vatalanib是有效的VEGFR酪氨酸激酶和血管生成抑制剂。

BFH772

MB3946

BMS-794833

MB3995

Telatinib

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.3825 mL

11.9124 mL

23.8248 mL

5 mM

0.4765 mL

2.3825 mL

4.7650 mL

10 mM

0.2382 mL

1.1912 mL

2.3825 mL

50 mM

0.0476 mL

0.2382 mL

0.4765 mL

VEGF受体酪氨酸激酶实验:
在96孔板上进行体外激酶实验，使用在杆状病毒体内表达的重组GST融合的激酶，通过谷胱甘肽-琼脂糖凝胶纯化。使用γ-[33P]ATP作为磷酸供体，聚(Glu:Tyr 4:1)肽段作为受体。重组GST融合蛋白在含1–3 mM MnCl2, 3–10 mM MgCl2, 0.25 mg/mL 聚乙二醇 20000, 和 1 mM DTT的 20 mM Tris·HCl(pH 7.5) 中稀释。每组GST融合激酶在含[20 mM Tris-HCl buffer (pH 7.5), 1–3 mM MnCl2, 3–10 mM MgCl2, 3–8 μg/mL 聚(Glu:Tyr 4:1), 0.25 mg/mL 聚乙二醇 20000, 8 μM ATP, 10 μM钒酸钠, 1 mM DTT, 和 0.2 μCi[γ -33P]ATP 的优化 buffer中，总体积为 30 μL，在有或无 实验底物存在时 ，在室温下温育10分钟。 加入10 μL 250 mM EDTA终止反应。使用96孔过滤系统， 转移一半体积 (20 μL) 到Immobilon-聚偏二氟乙烯膜上。 在 0.5% H3PO4中大规模冲洗膜，然后侵泡到甲醇中。烘干后, 加入Microscint“鸡尾酒疗法”试剂 ，使用闪烁计数器计数。通过对抑制百分数的线性回归分析，测定PTK787/ZK 222584或SU5416作用的IC50值。

细胞实验

• Cell lines:HUVECs
• Concentrations:0 到 10 μM
• Incubation Time:48 小时
• Method:测定 PTK787/ZK 222584抑制VEGF的功能性反应,根据BrdUrd摄入情况，进行内皮细胞增殖实验。分汇合培养的HUVECs接种在用1.5%包被的96孔板上，然后在37oC下生长培养基中温育。24小时后, 用含1.5% FCS 和恒定浓度VEGF(50 ng/mL), bFGF(0.5 ng/mL),或 FCS(5%)的基础培养基，在有或无PTK787/ZK 222584存在时,更换生长培养基。作为对照, 有些孔里不加生长因子。温育24小时后, 加入BrdUrd标签溶液，细胞再温育24小时，固定处理，阻断处理，然后加入过氧化物酶标记的anti-BrdUrd抗体。使用3,3′5,5′-四甲基联苯胺底物测定结合的抗体，通过分光光度计在450 nm处测量着色的反应产物。

动物实验

• Animal Models:皮下注射A431上皮癌, Ls174T结肠癌, HT-29 结肠癌, PC-3 前列腺癌, DU145 前列腺癌,和 CWR-22 前列腺癌细胞的裸鼠
• Formulation:Vatalanib溶于含5% DMSO和1% Tween-80的蒸馏水
• Dosages:25 mg/kg 到 100 mg/kg
• Administration:口服处理