CYC116

CYC116是一种有效的Aurora A/B抑制剂，Ki为8.0 nM/9.2 nM，对VEGFR2(Ki为44 nM)作用稍弱，比作用于CDKs效果强50倍，对PKA， Akt/PKB， PKC没有活性，对GSK-3α/β， CK2， Plk1和SAPK2A.没有抑制效果。

特性

CYC116是口服生物有效性的，小分子Aurora激酶/VEGFR2抑制剂。

靶点

体外研究

CYC116有效抑制Aurora A和 B激酶，效果比作用于任何CDKs都高50多倍，作用于Aurora A和B的 Ki分别为8.0和9.2 nM。使用MTT抗增殖实验测定CYC116作用于一组人类白血病和实体瘤细胞系，结果显示CYC116具有广谱抗癌效果，尤其显示作用于急性粒细胞性白血病细胞系MV4-11时IC50为34 nM。此外, CYC116的抗增殖活性与Aurora A和 B调节相关,比如抑制Aurora自磷酸化，组蛋白H3磷酸化和多倍性降低，随后由于细胞质不能分裂导致细胞死亡。

体内研究

CYC116口服给药皮下注射NCI-H460移植瘤的小鼠，持续5天，按剂量75和 100 mg/kg每天口服处理，导致肿瘤生长分别延迟2.3和5.8天。

TAK-901

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.7140 mL

13.5700 mL

27.1400 mL

5 mM

0.5428 mL

2.7140 mL

5.4280 mL

10 mM

0.2714 mL

1.3570 mL

2.7140 mL

50 mM

0.0543 mL

0.2714 mL

0.5428 mL

激酶实验:
使用25 μL 反应体积(25 mM β-甘油磷酸, 20 mM Tris/HCl, pH 7.5, 5 mM EGTA, 1 mM DTT, 1 mM Na3VO4, 10 μg kemptide(肽底物)), 和稀释在含0.5 mg/mL BSA, 2.5% 甘油,和 0.006% Brij-35的20 mM Tris/HCl中的重组Aurora A激酶稀释（pH 为8）进行Aurora A 激酶实验。加入5 μL Mg/ATP混合物 (15 mM MgCl2, 100 μM ATP, 及每孔含18.5 kBq γ-32P-ATP)，在30oC下温育30分钟，加入25 μL 75 mM H3PO4终止反应。

细胞实验

Cell lines:HeLa, MCF7, MV4-11和A2780细胞

• Concentrations:0到10 μM
• Incubation Time:72或96小时
• Method:进行标准MTT实验。细胞接种在96孔板上，在37oC下温育过夜。实验混合物溶解在DMSO中, 连续稀释3倍，储备于100 μL细胞培养基中，加到细胞中，重复2次， 在37oC下温育72或96小时。MTT溶于细胞培养基中，浓度为 5 mg/mL，溶液过滤消毒。从细胞中移除培养基，然后用PBS冲洗。每孔加入20 μL MTT溶液，然后在 37oC下黑暗温育4小时。移除MTT溶液，细胞再次用 200 μL PBS冲洗。 每孔用200 μL DMSO搅动溶解MTT染料。在540 nm处读取吸光值，使用曲线拟合软件分析数据，用于测定IC50值。

动物实验

Animal Models:腹腔注射NCI-H460细胞的小鼠

• Formulation:CYC116溶于DMSO，然后用水稀释。
• Dosages:75和100 mg/kg
• Administration:口服处理