VX-745

VX-745是有效的，选择性p38α抑制剂，IC50为10 nM,比作用于p38β选择性高22倍，对p38γ没有抑制作用。

靶点

p38α MAPK

p38β MAPK

IC50

10 nM

0.22 μM

体外研究

VX-745选择性抑制p38α和p38β MAPK，IC50分别为10nM和220 nM，但是对p38γ MAPK和其他激酶没有作用效果，IC50大于20 µM。人类外周血管单核细胞(PBMC)实验中, VX-745抑制IL-1β和TNF时IC50分别为56和52nM。VX-745抑制IL-1和TNFα,诱导的IL-6和IL-8产生，且抑制LPS和IL-1β调节的COX-2合成。60 nM-20 µM VX-745作用于骨髓基质细胞(BMSCs)，抑制IL-6和VEGF分泌,不影响细胞的生存能力。VX-745作用于BMSCs也抑制TNF-α诱导的IL-6分泌。VX-745作用于BMSCs，通过MM细胞粘附到BMSCs，抑制MM细胞增殖和IL-6分泌,说明VX-745能抑制旁分泌MM细胞生长，且能克服细胞粘附相关耐药性

体内研究

VX-745有效治疗鼠的佐剂性关节炎，ED50为5 mg/kg。VX-745作用于佐剂性关节炎鼠，抑制骨重吸收达93%，抑制炎症发生达56%。VX-745作用于软骨诱导性关节炎，呈现剂量反应降低。2.5, 5,和10 mg/kgVX-745作用于II型胶原诱导的关节炎鼠模型,与对照组相比，在炎症作用方面分别提高27%, 31%,和44%。此外，VX-745保护32-39%的骨骼和软骨。

特征

VX-745是有效的，选择性p38α和p38β MAPK抑制剂。

TAK-715

MB8816

LY2228820

MB4073

SB202190 (FHPI)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.2922 mL

11.4611 mL

22.9221 mL

5 mM

0.4584 mL

2.2922 mL

4.5844 mL

10 mM

0.2292 mL

1.1461 mL

2.2922 mL

50 mM

–

–

–

光度偶联酶实验:
通过光度偶联酶实验获得抑制p38α和p38β同系物的IC50值。在 0.1 M HEPES buffer [pH 为7.5,包含10%甘油, 10 mM MgCl2, 2.5 mM烯醇丙酮酸膦酸, 200 µM NADH, 150 µg/mL 丙酮酸激酶, 50 µg/mL乳酸脱氢酶,及200 µM EGF 受体肽(KRELVEPLTPSGEAPNQALLR)]中，混合浓度的酶(15 nM p38α或p38β)和溶于DMSO的VX-745在30oC下温育10分钟。加入100 µM (p38α)和70 µM ATP (p38β)反应开始。340nm处测定的吸光值随反应速率而降低。测定IC50值。

细胞实验

• Cell lines:人类骨髓基质细胞 (BMSCs)和多发性骨髓瘤(MM)细胞
• Concentrations:60 nM-20 μM, 溶于DMSO.
• Incubation Time:48小时
• Method:BMSCs(每孔5×104个细胞)或MM细胞(每孔3×104个细胞)在96孔板上37oC下温育48小时。测定 [3H]-胸甘([3H]TdR)摄入率而测定DNA合成。细胞和[3H]TdR (每孔0.5 μCi) 在48小时培养期的最后8小时间进行脉冲处理。测定MTT染料吸光值而测定VX-745抑制MM细胞和BMSCs生长的效果。

动物实验

• Animal Models:II型胶原诱导的关节炎(CIA)鼠模型 (DBA/1J)
• Formulation:溶于100%聚乙二醇
• Dosages:2.5, 5, 和 10 mg/kg
• Administration:口服饲喂，每天两次