BIIB021

BIIB021(CNF2024)是口服有效的，全部人工合成的，小分子HSP90抑制剂，Ki和EC50分别为1.7 nM和38 nM。

靶点

Hsp90

IC50

EC50为38 nM，Ki为1.7 nM。

体外研究

BIIB021结合到Hsp90的ATP结合袋中,干涉Hsp90伴侣功能,导致客户蛋白降解和肿瘤生长受抑制。BIIB021抑制肿瘤细胞(BT474, MCF-7, N87, HT29, H1650, H1299, H69和H82)增殖，IC50为0.06-0.31 μM。BIIB021诱导Hsp90客户蛋白包括HER-2, AKT,和Raf-1的降解，以及正向调节Hsp70和Hsp27。BIIB021抑制Hodgkin’s淋巴癌细胞(KM-H2, L428, L540, L540cy, L591, L1236和DEV)，IC50为0.24-0.8 μM。BIIB021作用于健康个体的淋巴细胞时活性低。BIIB021抑制NF-κB活性。BIIB021诱导Hodgkin’s淋巴癌细胞中激活NK细胞受体NKG2D配体的表达，导致对NK细胞调节的死亡敏感性上升。在体外，BIIB021增强HNSCCA细胞系(UM11B和JHU12)的放射敏感性，伴随关键放射反应蛋白的表达下降,增强凋亡细胞和增强G2期捕获。在体内外，与17-AAG相比，作用于肾上腺皮质癌H295R,BIIB021更有效。BIIB021的细胞毒性不受NQO1或Bcl-2过量表达缺失影响,分子损伤与17-AAG降低细胞杀伤力有关。BIIB021作用于抗17-AAG细胞系(NIH-H69,MES SA Dx5,NCI-ADR-RES, Nalm6等等)也有效。

体内研究

BIIB021口服处理多种移植瘤模型（包括N87, BT474, CWR22, U87, SKOV3和Panc-1）导致肿瘤生长受抑制。BIIB021按120 mg/kg剂量处理L540cy肿瘤，有效抑制肿瘤的生长。BIIB021作用于JHU12移植瘤，明显增强抗肿瘤生长功效。

特征

BIIB021是全人工合成的口服Hsp90抑制剂。

VER-155008

MB4056

Elesclomol (STA-4783)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.1372 mL

15.6858 mL

31.3716 mL

5 mM

0.6274 mL

3.1372 mL

6.2743 mL

10 mM

0.3137 mL

1.5686 mL

3.1372 mL

50 mM

0.0627 mL

0.3137 mL

0.6274 mL

Hsp90结合实验:
用于荧光偏振竞争测量, FITC-geldanamycin 探针 (20 nM) 和2 mM TCEP 在室温下 进行3 小时, 然后等分置于-80oC储存。 重组人类Hsp90α (0.8 nM) 和降低的 FITC-geldanamycin (2 nM) 在 含有实验buffer的96孔板上 在室温下温育3 小时，实验buffer包含20 mM HEPES (pH 为7.4), 50 mM KCl, 5 mM MgCl2, 20 mM Na2MoO4, 2 mM DTT, 0.1 mg/mL BGG,和0.1% (v/v) CHAPS。预温育后，加入溶于100% DMSO的BIIB021 ，最终浓度为0.2 nM 到10 μM (最终体积为100 μL, 2% DMSO)。反应在室温下进行16小时，在485和535 nm处测定荧光值。

细胞实验

• Cell lines:BT474, MCF-7, N87, HT29, H1650, H1299, H69和H82细胞
• Concentrations:3到1×103nM
• Incubation Time:5 天
• Method:使用修改的四唑鎓盐法测定IC50值。肿瘤细胞加到96孔板上繁殖 24小时，然后加入BIIB021。对照组加入DMSO (0.03-0.003%)。吩嗪硫酸甲酯(储存浓度为1 mg/mL) 和3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲羟苯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-四唑, 内盐 (储存浓度为2 mg/mL) 按1:20混合，加到96孔板的每孔中，温育。3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲羟苯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-四唑, 内盐的降低， 导致可溶性甲臢分泌到培养基中。温育4小时, 在490纳米处使用分光光度计测量甲臢。使用SOFTmaxPRO软件获得数据, 100% 生存力定义为用DMSO处理的细胞A490，用 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-5-(3-羧甲羟苯基)-2-(4-磺苯基)-2氢-四唑, 内盐(用DMSO处理细胞的平均A490 为0.03-0.003%)染色通过A490值计算每个样本存活百分数，计算按如下:存活率（%） = (A490 nm样本/ A490 nmDMSO处理的细胞 × 100)。

动物实验

• Animal Models:BALB/c和无胸腺鼠中的N87, BT474, CWR22, U87, SKOV3和 Panc-1肿瘤模型
• Formulation:磷脂/蔗糖乳剂
• Dosages:31, 62.5,和125 mg/kg
• Administration:每天口服处理一次