Pomalidomide

Pomalidomide抑制LPS诱导的TNF-α释放，在PBMCs中IC50为13 nM。

特性

Pomalidomide是Thalidomide 衍生物，效果比Thalidomide强10,000倍。

靶点

TNF-α (PBMCs) 13 nM

体外研究

Pomalidomide 抑制脂多糖(LPS)刺激的TNF-alpha释放，作用于人类 PBMC 和人类全部血液时，IC50分别为13 nM 和25 nM。Pomalidomide抑制 IL-2刺激的T 调节细胞，IC50为~1 μM。6.4 nM-10 μM Pomalidomide 处理人类外周血T细胞 ，提高 IL-2 产量，作用于CD4+子集比作用于CD8+子集有效。 Pomalidomide 比CC-5013显著促进IL-2, IL-5,和 IL-10, 比CC-5013稍微促进 IFN-γ。Pomalidomide 作用于Jurkat细胞，增强 SEE和 Raji细胞诱导的 AP-1 转录活性，1 μM时最高增强4倍，这种作用存在剂量依赖性。用不同浓度Pomalidomide(2.5-40 μg/mL) 处理Raji细胞48小时，导致细胞增殖和DNA合成明显降低，与对照组相比降低~40% 。

体内研究

Pomalidomide 作用于SCID小鼠，增强 Rituximab作用于B细胞淋巴瘤的抗癌效果。Pomalidomide和Rituximab联用使鼠平均寿命为74天，与 CC5013/Rituximab 处理的鼠平均寿命为58天。NK细胞耗尽则Pomalidomide和Rituximab协同作用完全被废除, 说明NK细胞增多是Pomalidomide增强 Rituximab抗癌的一个机制。

Apremilast (CC-10004)

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

3.6598 mL

18.2989 mL

36.5979 mL

5 mM

0.7320 mL

3.6598 mL

7.3196 mL

10 mM

0.3660 mL

1.8299 mL

3.6598 mL

50 mM

0.0732 mL

0.3660 mL

0.7320 mL

抑制TNF-α合成实验 :
在内毒素(LPS)刺激的PBMC中测定TNF-α抑制活性。Pomalidomide 加到PBMCs中1小时，然后加入LPS (1 μg/mL)，再处理18-20小时。收集悬浮液，通过ELISA测定悬浮液中的TNF-α浓度。通过回归曲线分析计算IC50值。人类全部血液TNF抑制实验和PBMC实验差不多，除了肝素化的新鲜血液直接加到微量滴定法板上。

细胞实验

• Cell lines:Raji,SU-DHL-4和SU-DHL-10 细胞系
• Concentrations:溶于DMSO, 终浓度为2.5-40 μg/mL
• Incubation Time:24或48小时
• Method:为了测定细胞凋亡,用Pomalidomide(5 μg/mL)处理淋巴瘤细胞系24小时或48小时。用FITC标记的膜联蛋白V和碘化丙啶进行细胞染色。使用荧光激活细胞分选仪/FACStar 和流式细胞仪，通过多色流式细胞仪分析细胞凋亡。如果膜联蛋白V阳性及碘化丙啶阴性/阳性，则判断为细胞凋亡(分布为凋亡早期和晚期)。为了测定细胞增殖，用Pomalidomide(2.5, 5, 10, 20,和40 μg/mL)处理淋巴瘤细胞系24小时或48小时。在96孔板上，每孔加入1 μCi[3H]-胸甘，细胞再温育18小时。收集细胞，加到96孔玻璃过滤器中，然后使用自动闪烁计数器测定摄取的[3H]-胸甘。

动物实验

• Animal Models:携带扩散性淋巴瘤的SCID小鼠
• Formulation:溶于DMSO，形成10 mg/mL 溶液，用0.9%无菌盐水稀释，终浓度为1 mg/mL
• Dosages:0.5 mg/kg
• Administration:腹腔注射