G007-LK

G007-LK是一种有效的选择性tankyrase抑制剂，对TNKS1/2的IC50分别为46 nM 和 25 nM。

体外研究

G007-LK减少Wnt /β-catenin信号通过防止聚(ADP-ribosyl)ation-dependent轴蛋白降解,从而促进β-catenin扰动。G007-LK完全块ligand-driven Wnt /β-catenin信号在细胞培养和显示大约50%的抑制APC突变在大多数CRC细胞系驱动信号。G007-LK(0.2μM)减少了科罗拉多州的数量- 320 – dm细胞有丝分裂从24%提高到12%,减少HCT-15细胞s阶段从28%降至18%。抑制CRC系COLO-320DM和SW403的菌落形成。G007-LK抑制类有机物生长，IC50为80 nM。

体内研究

G007-LK在异种移植和基因工程CRC模型中显示出抗肿瘤功效。 在COLO-320DM模型中，G007-LK可降低tankyrases 1和tankyrases 2蛋白质水平，稳定AXIN1和AXIN2，并降低β-catenin水平。 在功效研究肿瘤中，Wnt /β-连环蛋白信号传导以剂量依赖性方式被明显抑制，如β-连环蛋白激活基因NKD1，APCDD1和TNFRSF19（TROY）的表达降低以及β-表达增加所示。 连环蛋白抑制基因CLIC3。 G007-LK处理增加COLO-320DM肿瘤中KRT20和TM4SF4的表达。 G007-LK（每天两次20mg / kg）实现61％的肿瘤生长抑制。 G007-LK降低正常肠中的Wnt /β-连环蛋白信号传导和细胞增殖。

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

1.8869 mL

9.4347 mL

18.8693 mL

5 mM

0.3774 mL

1.8869 mL

3.7739 mL

10 mM

0.1887 mL

0.9435 mL

1.8869 mL

50 mM

0.0377 mL

0.1887 mL

0.3774 mL

TNKS1和TNKS2体外生化分析：
G007-LK在不同剂量(重复)下对TNKS1、TNSK2化学发光试剂盒的抑制活性进行了两次检测，并在GloMax发光计上测量其发光情况。

细胞实验

• Cell lines:APC-mutant CRC cell lines COLO-320DM
• Concentrations:~0.2 μM
• Incubation Time:7 to 13 days
• Method:
• 对于集落形成试验，细胞在2mL培养基中以500个细胞/孔接种。用0.06%二甲基亚砜或0.06%二甲基亚砜中的化合物处理三份井的细胞系，培养17天或直到菌落变得足够大以定量，每三天更换培养基和化合物。将200μL的12mM 3-(4,5-二甲基噻唑-2-基)-2,5-二苯基四唑溴化物加入每个孔中1小时，对菌落进行染色，用GelCount扫描仪在1200dpi分辨率下定量菌落数。

动物实验

• Animal Models:Human APC –mutant CRC xenograft COLO-320DM
• Formulation:15% DMSO, 17.5% Cremophor EL, 8.75% ethanol, 8.75% Miglyol 810N, 50% PBS
• Dosages:20 mg/kg
• Administration:i.p. twice daily