产品介绍
大肠杆菌055:B5脂多糖(Lipopolysaccharide,LPS),它是革兰氏阴性菌细胞壁的主要成分之一。本脂多糖由类脂A、核心多糖和O-多糖侧链组成。本产品常用于体外细胞活化、内毒素LAL检测等领域。大肠杆菌是一种革兰氏阴性菌,广泛存在于人和动物的肠道及环境中。根据O抗原的不同,可以将大肠杆菌分为不同的血清型,其中055:B5血清型是常见的一种。这种血清型的大肠杆菌可以通过发酵提取得到055:B5脂多糖。LPS由脂多糖内核、O特异链和芯多糖三部分组成。O特异链决定了脂多糖的血清型,055:B5血清型的LPS中的O特异链即为055。
LPS位于菌体外膜,在菌体的生长繁殖、结构完整性方面发挥重要作用。作为一种内毒素,LPS也是革兰氏阴性菌引起宿主产生病理反应的关键因素之一。作为一种重要的内毒素和炎症诱导子,055:B5 LPS广泛应用于多种生物医学研究中,如感染、炎症反应机制的研究。它可以刺激哺乳动物免疫细胞产生炎性因子,模拟细菌感染过程,用于研发治疗炎症性疾病的药物。此外,LPS也可以作为疫苗佐剂,增强疫苗免疫原性。在食品检测和水质检测中,LPS也用作内毒素标准品。总之,来源于大肠杆菌055:B5的LPS是一种用途广泛的生物产品。
生产工艺
我司来源于大肠杆菌055:B5的LPS主要通过发酵工艺商业化生产。将肠道定植的055:B5血清型大肠杆菌作为发酵菌种,加入营养培养基进行发酵培养,菌体生长繁殖并产生LPS。发酵好的产品通过热酚提取分离,最终得到055:B5 LPS产品。最终产品以冻干粉末包装,可用于各种科研和生产用途。
产品参数
英文名:………………Lipopolysaccharides (LPS)
别名:…………………LPS、内毒素、细菌内毒素
来源:…………………Escherichia coli 055:B5
纯度:…………………≥97%
外观:…………………类白色至黄褐色冻干粉
纯化方法:……………酚提取法
效价:…………………≥500000EU/mg
溶解性:………………water 5mg/ml
产品优势
我司制备的脂多糖纯度高。其蛋白含量极低(含量<3%),核酸含量极低(小于300ng/mg),可有效减少残存蛋白、核酸对实验带来的影响。同时我司脂多糖用途广泛,可用于体外细胞活化、炎症诱导模型、内毒素检测、感染反应机制研究等诸多领域。
保存条件:2-8℃保存,避光防潮密闭干燥。
运输条件:常温运输。
有效期:自生产之日起6年有效。
声明:本产品供科学研究和生产使用,用于组织和细胞的体外培养。禁止临床使用。
产品数据展示:
1、 LPS刺激RAW264.7鼠单核巨噬细胞:24小时后观察NO产生水平及细胞形态变化。(NO水平用Griess法测定)
表1 LPS刺激RAW264.7细胞Griess检测结果
处理组 | Griess检测结果 |
空白对照 | 0.061 |
Meilun LPS | 0.131 |
进口S品牌 | 0.084 |
图1 LPS刺激RAW264.7细胞效果图
2、LPS诱导BV2小鼠小胶质细胞:40小时后观察NO产生水平及细胞形态变化。(NO水平用Griess法测定)
表2 LPS刺激BV2细胞Griess检测结果
处理组 | Griess检测结果 |
空白对照 | 0.121 |
Meilun LPS | 0.172 |
进口S品牌 | 0.177 |
图2 LPS刺激BV2细胞效果图
3、LPS体内模型建立
实验动物:C57,雌雄各半
给药方式:腹腔注射
给药剂量:3mg/kg
药物配制:生理盐水将MB5198溶解成1mg/ml的溶液即可
实验分组:空白组-生理盐水
MB5198组-1mg/ml溶液
模型指标判断:一般行为指标,如下:
行为指标 | 评分标准 |
外观 | 0-光泽,光滑
1-部分毛发坚毛 2-背部全部毛发竖毛 3-蓬松,凌乱 4-焦粹 |
自主意识 | 0-活跃
1-活跃,不直立 2-活动减少迟缓,仍然行走 3-挑衅后才活动,行动震颤 4-挑衅后仍静止不动 |
自主活动 | 0-活动数量正常(摄食,饮水,攀爬,行走,打斗等)
1-活动减少,只在笼底活动 2-活动显著减少,静止,偶尔探索活动 3-静止不动 4-静止不动,颤抖(特别是后肢) |
对刺激的反应 | 0-迅速反应
1-对声音无反应或者反应慢,对触础反应强烈(马上逃离) 2-对声音无反应,对触碰反应一般(走几步) 3-对声音无反应,对触碰反应弱(不移动) 4-对声音无反应,对触碰反应几乎无反应,推倒后不能翻身 |
眼睛 | 0-全开
1-没有全开,可能有分泌 2-半闭,可能有分泌 3-没有全闭,可能有分泌 4-闭合或者显著分泌物(浑浊) |
呼吸频率 | 0-正常
1-轻微减少(肉眼无法计数) 2-中度减少(肉眼勉强能计数) 3-显著减少(肉眼能轻松计数,呼吸间隔0.5s) 4-极度减少(呼吸间限>Is) |
呼吸质量 | 0-正常
1-间断性呼吸困难 2-呼吸困难,不喘气 3-呼吸困难,间断性喘气 4-喘气 |
实验结果:
(1)一般行为指标评分结果:
组别 | 给药前 | 给药2天 | ||
体重g | 行为评分 | 体重g | 行为评分 | |
空白组 | 20.3 | 0 | 20.5 | 0 |
20.2 | 0 | 20.7 | 0 | |
20.6 | 0 | 21.1 | 0 | |
20.1 | 0 | 20.5 | 0 | |
MB5198组 | 19.7 | 0 | 16.6 | 6 |
20.4 | 0 | 17.0 | 6 | |
20.1 | 0 | 16.6 | 9 | |
21.0 | 0 | 18.3 | 9 |
我司脂多糖给药后,小鼠体重显著降低,行为评分明显提高。
(2)一般行为指标部分效果图
图3 LPS给药后实验动物效果图
红色标记指出MB5198组给药后实验动物眼睛出现一定程度的闭合或者显著分泌物。
附件:实验详细结果
day0 | day2 | ||||||||||
组别 | 编号 | 体重g | 给药μl | 体重g | 外观 | 自主意识 | 自主活动 | 对刺激反应 | 眼睛 | 呼吸频率 | 呼吸质量 |
空白组 | 雄性-1 | 20.3 | 60.9 | 20.5 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 |
雄性-2 | 20.2 | 60.6 | 20.7 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
雌性-1 | 20.6 | 61.8 | 21.1 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
雌性-2 | 20.1 | 60.3 | 20.5 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | 0 | |
MB5198组 | 雄性-1 | 19.7 | 59.1 | 16.6 | 1 | 2 | 2 | 0 | 1 | 0 | 0 |
雄性-2 | 20.4 | 61.2 | 17.0 | 1 | 2 | 2 | 0 | 1 | 0 | 0 | |
雌性-1 | 20.1 | 60.3 | 16.6 | 1 | 2 | 2 | 2 | 4 | 0 | 0 | |
雌性-2 | 21.0 | 63 | 18.3 | 2 | 3 | 2 | 0 | 2 | 0 | 0 |
注:动物实验个体差异性较大,实验数据仅供参考。