FDA活细胞荧光示踪探针；荧光素二乙酸酯

简介：Fluorescein diacetate 是一种细胞渗透性的酯酶底物。Fluorescein diacetate 可作为人谷胱甘肽硫转移酶 Pi (hGSTP1-1) 的荧光底物。
物理性状及指标：
外观：……………………白色至微黄色粉末
熔点：……………………200-203 °C(lit.)
溶解性：…………………DMSO: ≥ 48 mg/mL；丙酮：25 mg/mL
纯度：……………………≥97%（HPLC）
吸光度：…………………Ex (nm)494；Em (nm)521
敏感性：…………………对空气敏感
生物活性

用途及描述：科研试剂，广泛应用于分子生物学，药理学等科研方面，严禁用于人体。FDA是一种非荧光性疏水性荧光素衍生物，它可以穿透细胞膜进入细胞，通过细胞内酯酶催化水解二乙酸酯基团产生具有高强度的荧光产物荧光素。荧光分子在具有完整细胞膜的细胞内积累，因此这种绿色荧光可以作为一种细胞活力的标签。不具有完整细胞膜或者新陈代谢活性的细胞，不能在细胞内积累荧光产物，因此不能显现绿色荧光。FDA可以与染料PI联合使用，无活性的死细胞被PI着色，发出红色荧光；有活性的细胞PI无法着色，在FDA作用下，紧发出绿色荧光。这两种颜色可以很好的辨别死细胞与活细胞，与单一颜色检测相比，它提供了一种更为准确的活细胞定量检测方法
储液配置

经典实验操作（仅供参考）

使用方法举例（仅供参考）
1.准备2-10 mM DMSO储备溶液
将4.2mg溶于1ml DMSO中以制备10mM储备溶液（1mg / ml相当于~2.4mM）
注意：应立即使用原液; 应将任何剩余的溶液等分并在<-20℃冷冻。 避免反复冻融循环，避免光照。
2.准备染料工作溶液
在使用之前，通过用Hanks和20mM Hepes缓冲液（HHBS）或您选择的缓冲液（pH7）稀释步骤1中的DMSO储备溶液，准备1至20μM染料工作溶液。通过涡旋混合均匀。
3.用流式细胞仪或荧光显微镜分析细胞：
3.1用测试化合物细胞培养一段所需的时间。
3.2离心细胞，每管2-10×105个细胞。
3.3在500μL染料工作溶液中重悬细胞（来自步骤2）。
3.4在室温或37°C下用染料溶液孵育细胞15至30分钟，避光。
3.5从细胞中取出染料工作溶液，用HHBS或您选择的缓冲液清洗细胞。 将细胞重悬于500μL预热的HHBS或培养基中，得到每管2-10×105个细胞。
3.6用流式细胞仪（FL1通道）或荧光显微镜观察Ex / Em = 490 / 520nm处的荧光变化。
注意：对于细菌细胞染色：当通过测试细菌过夜生长预处理的营养肉汤中1：800稀释储备溶液时，染色是最有效的，但也可以使用新鲜营养肉汤或PBS。 细菌悬浮液应用PBS稀释至每毫升105-107个生物。 可以通过将1ml溶液施加到.45μm过滤器（25mm）并真空过滤除去溶液，然后加入1ml染料溶液并在室温下孵育5-10分钟来染色细菌。
【注意】

●我司产品为非无菌包装，若用于细胞培养，请提前做预处理，除去热原细菌，否则会导致染菌。
●部分产品我司仅能提供部分信息，我司不保证所提供信息的权威性，以上数据仅供参考交流研究之用。