巴佛洛霉素A1(粉末)

¥2,200.00

规格: 500 μg

CAS 号: 88899-55-2
英文名字:Bafilomycin A1, from Streptomyces griseus
质量标准:>95%,BR
货号: MB5505-1

产品简介:

Bafilomycin A1是从链霉菌属物种分离的大环内酯抗生素,是液泡V-ATP酶的抑制剂。

英文名字:Bafilomycin A1, from Streptomyces griseus
别名:(-)-Bafilomycin A1;巴佛洛霉素A1
分子式:C35H58O9 分子量: 622.83

储存条件:

-20℃,避光防潮密闭干燥

运输条件:

2~8℃运输

用途及描述:

科研试剂,广泛应用于分子生物学,药理学等科研方面,严禁用于人体。 巴佛洛霉素A1来源于灰色链霉菌(Streptomyces griseus),是动物细胞、植物细胞和微生物液泡型H+-ATP酶(V-ATP酶)的一种特异性抑制剂。

储液配置
1 mg 5 mg 10 mg
1 mM 1.6056 mL 8.0279 mL 16.0557 mL
5 mM 0.3211 mL 1.6056 mL 3.2111 mL
10 mM 0.1606 mL 0.8028 mL 1.6056 mL
50 mM
经典实验操作(仅供参考)
激酶实验
ATPase 酶活性试验:

ATPase酶测定培养基包含6 mM MgSO4,50 mM HEPES (pH 7.4),200 mM Na2SO3(V-ATPase 活化剂),0.5 mM 原钒酸钠(P-ATPase抑制剂),0.5 mM 叠氮化钠(F-ATPase抑制剂)和3 mM Na2ATP。该培养基(1.0 mL)加入或不加入V型ATPase抑制剂bafilomycin A1,与过滤的匀浆(0.1 mL)在23–25 °C下培养60分钟。通过加入1 mL 3%TCA停止反应。广谱测定的空白对照根据酶测定制备,除了组织样本是在酸之后加入。磷酸盐的分析通过加入2 mL正丁醇和0.2 mL 钼酸盐溶液(5 g 钼酸铵,22 mL H2SO4到100 mL)完成。涡旋15秒后,溶液用0.5 mL柠檬酸盐溶液(100 g/500 mL,pH 7.0)中和,再涡旋15秒。然后将溶液离心(2000×g;3分钟)以分离出丁醇相,其吸光度在400 nm下读出。制备标准正磷酸盐(0.1 μM–2.0 μM),并以酶活性检测相同的方式处理。酶活性表示为每小时和每毫克蛋白质释放的正磷酸盐的微摩尔量。V-ATPase活性被认为是Na2SO3,原钒酸钠和叠氮化钠存在下测得的V-ATPase活性,与这些试剂和特定V-ATPases抑制剂Bafilomycin A1存在下测得的ATPase活性之间的差异。

细胞实验
  • Cell lines:HeLa细胞
  • Concentrations:~20 nM
  • Incubation Time:20小时
  • Method:幽门螺旋杆菌加入HeLa细胞之前,用抑制剂处理,如下:10 mM DCCD在30℃下处理1小时;100 μM NBD-CI在30℃下处理1小时,反应用10 mM终浓度的甘氨酸阻断;275 μM NEM在30℃下处理1小时,通过加入275 mM β-巯基乙醇阻断反应;14 μM Mg-ATP在0℃下处理1小时;100 μM KNO3和14 μM Mg-ATP在30℃下处理1小时;100 μM NaCO3,pH 11在0℃下处理1小时。然后将细菌提取物加入细胞,稀释40倍,终浓度为0.65 mg/mL。对照组为HeLa细胞和未处理的细菌提取物,以及细菌提取物处理时相同环境下抑制剂Bafilomycin A1处理的细胞,稀释40倍后在相同的浓度下进行培养。分析细菌提取物的空泡活性。
动物实验
  • Animal Models:年幼的(大约9天大)莫三鼻口孵鱼,莫桑比克罗非鱼
  • Formulation:包含0.05 % 二甲基亚砜(DMSO)的鱼缸水
  • Dosages:10 μM
  • Administration:–
【注意】
●我司产品为非无菌包装,若用于细胞培养,请提前做预处理,除去热原细菌,否则会导致染菌。
●部分产品我司仅能提供部分信息,我司不保证所提供信息的权威性,以上数据仅供参考交流研究之用。
参考文献
[1] al-Fifi ZI, et al. Insect BiochemMol Biol, 1998, 28(4), 201-211.
[2] Oliveira PF, et al. Comp Biochem Physiol A Mol Integr Physiol, 2004, 139(4), 425-432.
[3] Fenwick JC, et al. J Exp Biol, 1999, 202 Pt 24, 3659-3666.
[4] Papini E, et al. Mol Microbiol, 1993, 7(2), 323-327.
[5] Bayer N, et al. J Virol, 1998, 72(12), 9645-9655.
[6] Yoshimori T, et al. J Biol Chem, 1991, 266(26), 17707-17712.
[7] Yamamoto A, et al. Cell Struct Funct, 1998, 23(1), 33-42.
[8] Sundquist KT, et al. J Bone Miner Res, 1994, 9(10), 1575-1582.
规格

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