NVP-BKM120

Buparlisib (BKM120, NVP-BKM120) 是一种选择性PI3K抑制剂，在无细胞试验中作用于p110α/β/δ/γ的IC50分别为 52 nM/166 nM/116 nM/262 nM。对 VPS34，mTOR，DNAPK 的作用效果下降，而对 PI4Kβ几乎没有活性。

特性

BKM120是可用于口服的生物有效的PI3K抑制剂。

靶点

体外研究

BKM120作用于解除PI3K调节的细胞系，包括A2780, U87MG, MCF7和DU145时，具有抗增殖活性，GI50为0.1-0.7 nM。BKM120诱导多发性骨髓瘤细胞(ARP1, ARK, MM.1S, MM1.R和U266)凋亡，导致G1期细胞增多，S期细胞减少。BKM120诱导CD138+原代MM 细胞凋亡，且作用于CD138−基质细胞时毒性较低。BKM120可引起BimS的上调和XIAP的下调。BKM120作用于人类胃癌细胞系，降低mTOR下游信号，具有抗增殖活性。BKM120作用于KRAS突变的胃癌细胞系，可以增强p-ERK或 p-STAT3。BKM120 和STAT3阻断剂联用, 作用于含突变KRAS的细胞，诱导凋亡，具有协同效应，但是作用于KRAS野生型细胞没有这种效果。BKM120主要通过Aurora B激酶调节有丝分裂崩坏。

体内研究

BKM120按30, 60, 或100 mg/kg剂量作用于A2780移植瘤，完全抑制pAKTser473。BKM120按 30和 60 mg/kg剂量作用于U87MG神经胶质瘤模型，显示抗癌活性。BKM120每天按5μM/kg剂量处理具有持久生命力的ARP1 SCID鼠模型，导致肿瘤体积和K链水平明显降低。

PIK-293

MB6028

SAR245409 (XL765)

MB5319

XL-147

1 mg

5 mg

10 mg

1 mM

2.4367 mL

12.1835 mL

24.3671 mL

5 mM

0.4873 mL

2.4367 mL

4.8734 mL

10 mM

0.2437 mL

1.2184 mL

2.4367 mL

50 mM

0.0487 mL

0.2437 mL

0.4873 mL

PI3K 生化实验(ATP 消耗实验):
BKM120溶于DMSO中，按每孔1.25 µL直接加到黑色384孔板上。开始反应, 25 µL 10nM PI3K和5 µg/mL 1-α-磷酸肌醇(PI)加到实验 buffer (10 mM Tris pH 为7.5, 5 mM MgCl2, 20 mM NaCl, 1 mM DTT，及0.05% CHAPS)，然后加到每孔中，随后在实验buffer中加入25 µL 2 µM ATP。反应进行直到50% ATP被消耗，然后加入25 µL KinaseGlo溶液终止反应。终止的反应温育5分钟，然后通过荧光测定残留的ATP。

细胞实验

• Cell lines:A2780细 胞
• Concentrations:0-6.6 μM
• Incubation Time:3天
• Method:A2780细胞培养在含10% FBS,L-谷氨酸,丙酮酸钠和抗生素的DMEM培养基上。细胞按每孔103个细胞的密度接种在相同培养基上，温育3到5小时。稀释溶于20 mM DMSO中的BKM120。2 µL稀释的BKM120溶液加到细胞培养基上, (浓度为0-6.6 µM)。等体积(100 µL)溶液加到96孔板中，在37oC下温育3天。使用Trilux读取荧光值而测定抑制细胞增殖的效果

动物实验

• Animal Models:携带U87MG 和A2780移植瘤的雌性裸鼠
• Formulation:15% Captisol
• Dosages:~60 mg/kg
• Administration:每天口服处理